ATCC CRL-2100(KU812E) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-2100(KU812E)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2100(KU812E), KU812E, 人外周血慢性髓性白血病细胞 存储人: K Kishi 种属来源: 人 组织来源: 外周血 疾病特征: 外周血慢性髓性白血病 细胞形态: 髓样 生长特性: 悬浮生长 培养基: RPMI 1640，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-2100 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Kishi K. A new leukemia cell line with Philadelphia chromosome characterized as basophil precursors. Leuk. Res. 9: 381-390, 1985. PubMed: 3858609 Okano H, et al. Hemoglobin synthesis of both adult and fetal types in a human CML cell line. J. Biochem. 104: 162-164, 1988. PubMed: 2460439 Okamura S, et al. Expression of cytokine genes in hematological malignancies. Nippon Ketsueki Gakkai Zasshi 52: 1423-1432, 1989. PubMed: 2698048 NTCC CRL-2100(KU812E)人外周血慢性髓性白血病细胞特点和简介 该细胞核型为58，X,Y；可产生TGF-β。 NTCC CRL-2100(KU812E)人外周血慢性髓性白血病细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2100(KU812E)人外周血慢性髓性白血病细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2100(KU812E)人外周血慢性髓性白血病细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC HTB-134(Hs 766T) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC HTB-134(Hs 766T)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-134(Hs 766T), Hs 766T,Hs766T, 人胰腺癌细胞 存储人: RB Owens 种属来源: 人 组织来源: 胰腺 疾病特征: 胰腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: HTB-134 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 8,11 D16S539: 9,12 D5S818: 11 D7S820: 10 THO1: 6,9.3 TPOX: 8 vWA: 18 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1-2 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 1 PGM1, 1-2 PGM3, 1 参考文献: Owens RB, et al. Epithelial cell cultures from normal and cancerous human tissues. J. Natl. Cancer Inst. 56: 843-849, 1976. PubMed: 176412 Smith HS. In vitro properties of epithelial cell lines established from human carcinomas and nonmalignant tissue. J. Natl. Cancer Inst. 62: 225-230, 1979. PubMed: 283258 Lan MS, et al. Polypeptide core of a human pancreatic tumor mucin antigen. Cancer Res. 50: 2997-3001, 1990. PubMed: 2334903 NTCC HTB-134(Hs 766T)人胰腺癌细胞特点和简介 该细胞1973年由 R. Owens等建系，源自62岁白人男性的胰腺癌的转移淋巴结。 NTCC HTB-134(Hs 766T)人胰腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-134(Hs 766T)人胰腺癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-134(Hs 766T)人胰腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC SCRC-1039(CE3) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC SCRC-1039(CE3)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC SCRC-1039(CE3), CE3, 小鼠胚胎干细胞 存储人: DI Gottlieb 种属来源: 小鼠 组织来源: 胚胎 疾病特征: 正常 细胞形态: 球形 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM，GIBCO，货号41500034)，90%；FBS，10%。 产品目录号: SCRC-1039 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Matise M, et alProduction of targeted embryonic stem cell clonesIn: Matise M, et alGene Targeting: A Practical ApproachOxfordOxford University Press101-132, 1999 Adams LD, et al. Double lox targeting for neural cell transgenesis. Brain Res. Mol. Brain Res. 110: 220-233, 2003. PubMed: 12591158 NTCC SCRC-1039(CE3)小鼠胚胎干细胞特点和简介 小鼠全能性胚胎干细胞，每支细胞量1×106。 NTCC SCRC-1039(CE3)小鼠胚胎干细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC SCRC-1039(CE3)小鼠胚胎干细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC SCRC-1039(CE3)小鼠胚胎干细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CRL-11233(THLE-3) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-11233(THLE-3)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-11233(THLE-3), THLE-3, 人肝永生化细胞 存储人: National Cancer Institute 种属来源: 人 组织来源: 肝脏 疾病特征: 正常 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM，GIBCO，货号41500034)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-11233 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11,12 D13S317: 13 D16S539: 11,12 D5S818: 13 D7S820: 8,10 THO1: 8,9.3 TPOX: 6,9 vWA: 17,18 参考文献: Harris CC, et al. Human liver epithelial cells. US Patent 5,759,765 dated Jun 2 1998 Pfeifer AM, et al. Simian virus 40 large tumor antigen-immortalized normal human liver epithelial cells express hepatocyte characteristics and metabolize chemical carcinogens. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 5123-5127, 1993. PubMed: 7685115 Pfeifer AM, et al. Simian virus 40 large tumor antigen-immortalized normal human liver epithelial cells express hepatocyte characteristics and metabolize chemical carcinogens. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 5123-5127, 1993. PubMed: 7685115 NTCC CRL-11233(THLE-3)人肝永生化细胞特点和简介 THLE-2 (NTCC CRL-10149 和 THLE-3 (NTCC CRL-11233)细胞系是正常肝细胞用SV40大T抗原转染得到。 将含有SV40 T抗原的Bgl I-Hpa I片段的逆转录病毒载体导入兼嗜性包装细胞株PA317中生产病毒。 THLE-2 and THLE-3表达正常成人肝上皮细胞特征性的表型。 当注射到无胸腺裸鼠中时，它们不成瘤，具有接近二倍体的核型，不表达甲胎蛋白。 THLE-2 and THLE-3将benzo[a]pyrene, N-nitrosodimethylamine, 和 aflatoxin B1代谢成附着于DNA的最终成瘤代谢物，从而揭示细胞色素P450途径的发挥作用。 THLE也保留了其他与化学致瘤物代谢相关的酶，比如epoxide hydrolase, NADPH cytochrome P450 reductase, superoxide dismutase, catalase, glutathione S-transferases, and glutathione peroxidase 这些永生化人肝细胞构成了研究药物毒理学和人肝细胞癌的病原学及病理的体外模型。 1993年一月提交到NTCC的培养物污染了支原体。 其后代用去支原体试剂进行处理21天。 处理后六周，用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测。 结果都呈阴性。 NTCC CRL-11233(THLE-3)人肝永生化细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-11233(THLE-3)人肝永生化细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-11233(THLE-3)人肝永生化细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CCL-92(3T3-Swiss albino) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CCL-92(3T3-Swiss albino)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CCL-92(3T3-Swiss albino), 3T3-Swiss albino, 小鼠胚胎成纤维细胞 存储人: H Green 种属来源: 小鼠 组织来源: 胚胎 疾病特征: 正常 细胞形态: 成纤维细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: CCL-92 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 备注: Nucleotide (GenBank) : X85983 M.musculus mRNA for carnitine acetyltransferase. Nucleotide (GenBank) : U85711 Mus musculus phospholipase C delta-1 mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : U85713 Mus musculus phospholipase C-beta-1b mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : U85714 Mus musculus phospholipase C-beta-1b' mRNA, complete cds. 参考文献: Todaro GJ, Green H. Quantitative studies of the growth of mouse embryo cells in culture and their development into established lines. J. Cell Biol. 17: 299-313, 1963. PubMed: 13985244 Bennicelli JL, et al. Mechanism for transcriptional gain of function resulting from chromosomal translocation in alveolar rhabdomyosarcoma. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 5455-5459, 1996. PubMed: 8643596 Vogt M, Dulbecco R. Studies on cells rendered neoplastic by polyoma virus: the problem of the presence of virus-related materials. Virology 16: 41-51, 1962. PubMed: 13926482 Todaro GJ, et al. Antigenic and cultural properties of cells doubly transformed by polyoma virus and SV40. Virology 27: 179-185, 1965. PubMed: 4284655 NTCC CCL-92(3T3-Swiss albino)小鼠胚胎成纤维细胞特点和简介 3T3 细胞株1962年从分解的瑞士小鼠胚胎中建立。 这株细胞是接触抑制的。 一个长满的单层产量是40000细胞/平方厘米。测试发现肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。 细胞应长在塑料瓶中，在一些玻璃表面上可能长不好。 饱和密度可以达到约50000细胞/平方厘米。 NTCC CCL-92(3T3-Swiss albino)小鼠胚胎成纤维细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CCL-92(3T3-Swiss albino)小鼠胚胎成纤维细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-92(3T3-Swiss albino)小鼠胚胎成纤维细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CRL-2014(HGF-1) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-2014(HGF-1)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2014(HGF-1), HGF-1, 人牙龈成纤维细胞 存储人: BS McAllister 种属来源: 人 组织来源: 牙龈 疾病特征: 正常 细胞形态: 成纤维细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-2014 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11 D13S317: 8,12 D16S539: 11,13 D5S818: 12 D7S820: 10 THO1: 6,7 TPOX: 8,11 vWA: 17,18 参考文献: McAllister BS, et al. Bradykinin receptors and signal transduction pathways in human fibroblasts: integral role for extracellular calcium. Arch. Biochem. Biophys. 304: 294-301, 1993. PubMed: 7686736 McAllister BS, et al. Bradykinin inhibition of EGF- and PDGF-induced DNA synthesis in human fibroblasts. Am. J. Physiol. 265: C477-C484, 1993. PubMed: 8396328 NTCC CRL-2014(HGF-1)人牙龈成纤维细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2014(HGF-1)人牙龈成纤维细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2014(HGF-1)人牙龈成纤维细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CRL-5922(NCI-H2087) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-5922(NCI-H2087)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-5922(NCI-H2087),NCI-H2087, 人非小细胞肺腺癌细胞 存储人: AF Gazdar, JD Minna 种属来源: 人 组织来源: 肺 疾病特征: 非小细胞肺腺癌 细胞形态: 上皮细胞样混有圆形 生长特性: 疏松贴壁 培养基: RPMI-1640，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-5922 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D5S818: 11 D13S317: 12 D7S820: 8, 10 D16S539: 9, 11 THO1: 7, 9 TPOX: 11 vWA: 17 参考文献: NCI-Navy Medical Oncology Branch Cell Line Supplement. J. Cell. Biochem. suppl. 24: 1996. NTCC CRL-5922(NCI-H2087)人非小细胞肺腺癌细胞特点和简介 该细胞是1988年11月从一名69岁白人男性（60年烟龄）非小细胞性肺腺癌淋巴结转移组织中分离得到的。 NTCC CRL-5922(NCI-H2087)人非小细胞肺腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-5922(NCI-H2087)人非小细胞肺腺癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-5922(NCI-H2087)人非小细胞肺腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC HTB-185(D283 Med) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC HTB-185(D283 Med)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-185(D283 Med), D283 Med, 人脑髓母细胞瘤细胞 存储人: HS Friedman 种属来源: 人 组织来源: 脑 疾病特征: 脑髓母细胞瘤 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长，聚团，少数贴壁 培养基: MEM培养基(MEM，GIBCO，货号41500034)，90%；FBS，10%。 产品目录号: HTB-185 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 9,12 D13S317: 8,10 D16S539: 11 D5S818: 11 D7S820: 10 THO1: 7 TPOX: 8,11 vWA: 16,18 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 0 PGM1, 1 PGM3, 1 参考文献: Friedman HS, et al. Phenotypic and genotypic analysis of a human meduloblastoma cell line and transplantable xenograft (D341 Med) demonstrating amplification of c-myc. Am. J. Pathol. 130: 472-484, 1988. PubMed: 3279793 He XM, et al. Expression of O6-methylguanine-DNA methyltransferase in six human medulloblastoma cell lines. Cancer Res. 52: 1144-1148, 1992. PubMed: 1737373 Friedman HS, et al. Establishment and characterization of the human medulloblastoma cell line and transplantable xenograft D283 Med. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 44: 592-605, 1985. PubMed: 4056828 NTCC HTB-185(D283 Med)人脑髓母细胞瘤细胞特点和简介 该细胞1985年由Friedman等建系，源自一名6岁患有神经管细胞瘤有腹腔转移的白人男性小孩的腹水细胞。 NTCC HTB-185(D283 Med)人脑髓母细胞瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-185(D283 Med)人脑髓母细胞瘤细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-185(D283 Med)人脑髓母细胞瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC HB-12317(NG108-15) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC HB-12317(NG108-15)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HB-12317(NG108-15), NG108-15, 小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞 存储人: Univ. Texas Southwestern Medical Cntr. 种属来源: 小鼠、大鼠 组织来源: 神经 疾病特征: 小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞 细胞形态: 扁平，圆形，10到100微米直径 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: HB-12317 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 参考文献: Hamprecht B. Structural, electrophysiological, biochemical, and pharmacological properties of neuroblastoma-glioma cell hybrids in cell culture. Int. Rev. Cytol. 49: 99-170, 1977. PubMed: 16829 Hamprecht B, et al. Culture and characteristics of hormone-responsive neuroblastoma X glioma hybrid cells. Methods Enzymol. 109: 316-341, 1985. PubMed: 2985920 Bernd Hamprecht, personal communication NTCC HB-12317(NG108-15)小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞特点和简介 NG108-15细胞株，原名108CC15。 这个细胞株由小鼠N18TG2 神经母细胞瘤细胞和大鼠C6-BU-1神经胶质瘤细胞在失活仙台病毒存在下融合而成。 NTCC HB-12317(NG108-15)小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HB-12317(NG108-15)小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HB-12317(NG108-15)小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CRL-2528(PT-K75) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-2528(PT-K75)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2528(PT-K75), PT-K75, 猪鼻甲黏膜成纤维细胞 存储人: CL Kanitz 种属来源: 猪 组织来源: 鼻黏膜 疾病特征: 正常 细胞形态: 成纤维细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-2528 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: NTCC CRL-2528(PT-K75)猪鼻甲黏膜成纤维细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2528(PT-K75)猪鼻甲黏膜成纤维细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2528(PT-K75)猪鼻甲黏膜成纤维细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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