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ATCC CRL-2314(HCC38) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC CRL-2314(HCC38)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2314(HCC38), HCC38, 人乳腺原发性导管癌 存储人: AF Gazdar, AK Virmani 种属来源: 人 组织来源: 乳腺 疾病特征: 乳腺原发性导管癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI 1640，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-2314 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 12,14 D16S539: 10,14 D5S818: 9 D7S820: 10 THO1: 9.3 TPOX: 9,12 vWA: 16,17 参考文献: Gazdar AF, et al. Characterization of paired tumor and non-tumor cell lines established from patients with breast cancer. Int. J. Cancer 78: 766-774, 1998. PubMed: 9833771 Sundarsan V, et al. Homozygous deletions at 3p12 in breast and lung cancer. Oncogene 17: 1723-1729, 1998. PubMed: 9796701 NTCC CRL-2314(HCC38)人乳腺原发性导管癌特点和简介 该细胞于1992年从一位50岁的白人女性乳腺导管癌组织中分离建立，该患者曾有平滑肌肉瘤的病史，其母亲死于乳腺癌；该细胞癌基因her2/neu-，p53+；上皮细胞特异性标志物EGP2（上皮糖蛋白2）和CK19阳性，ER和PR阴性。 NTCC CRL-2314(HCC38)人乳腺原发性导管癌接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2314(HCC38)人乳腺原发性导管癌培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2314(HCC38)人乳腺原发性导管癌培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC CRL-2329(HCC1500) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC CRL-2329(HCC1500)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2329(HCC1500), HCC1500, 人乳腺原发性导管癌 存储人: AF Gazdar, AK Virmani 种属来源: 人 组织来源: 乳腺 疾病特征: 乳腺原发性导管癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-2329 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10 D13S317: 10 D16S539: 9,10 D5S818: 11,13 D7S820: 11 THO1: 9 TPOX: 8 vWA: 13,16 参考文献: Gazdar AF, et al. Characterization of paired tumor and non-tumor cell lines established from patients with breast cancer. Int. J. Cancer 78: 766-774, 1998. PubMed: 9833771 Sekido Y, et al. Cloning of a breast cancer homozygous deletion junction narrows the region of search for a 3p21.3 tumor suppressor gene. Oncogene 16: 3151-3157, 1998. PubMed: 9671394 NTCC CRL-2329(HCC1500)人乳腺原发性导管癌接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2329(HCC1500)人乳腺原发性导管癌培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2329(HCC1500)人乳腺原发性导管癌培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC HTB-123(DU4475) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC HTB-123(DU4475)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-123(DU4475), DU4475, 人乳腺上皮细胞 存储人: AJ Langlois 种属来源: 人 组织来源: 乳腺上皮细胞 疾病特征: 正常 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: RPMI 1640，90%；FBS，10%。 产品目录号: HTB-123 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 9,12 D13S317: 11,14 D16S539: 11,12 D5S818: 11 D7S820: 9,10 THO1: 6,8 TPOX: 8 vWA: 17 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 2 PGM1, 1-2 PGM3, 1 参考文献: Faust JB, Meeker TC. Amplification and expression of the bcl-1 gene in human solid tumor cell lines. Cancer Res. 52: 2460-2463, 1992. PubMed: 1568216 Langlois AJ, et al. Morphological and biochemical properties of a new human breast cancer cell line. Cancer Res. 39: 2604-2613, 1979. PubMed: 221108 NTCC HTB-123(DU4475)人乳腺上皮细胞特点和简介 该细胞源自一位70岁白人女性的乳腺癌组织，电镜观察该细胞有大量桥粒及交错的微绒毛。 NTCC HTB-123(DU4475)人乳腺上皮细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-123(DU4475)人乳腺上皮细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-123(DU4475)人乳腺上皮细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC HTB-23(MDA-MB-134-VI) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC HTB-23(MDA-MB-134-VI)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-23(MDA-MB-134-VI), MDA-MB-134-VI, 人乳腺导管癌细胞 存储人: R Cailleau 种属来源: 人 组织来源: 乳腺 疾病特征: 乳腺导管癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: HTB-23 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10,12 D13S317: 8 D16S539: 13 D5S818: 11,12 D7S820: 10,11 THO1: 6,9 TPOX: 8,11 vWA: 14,15 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1 Me-2, 1 PGM1, 1 PGM3, 1 参考文献: Brinkley BR, et al. Variations in cell form and cytoskeleton in human breast carcinoma cells in vitro. Cancer Res. 40: 3118-3129, 1980. PubMed: 7000337 Cruciger Q, et al. Morphological, biochemical and chromosomal characterization of breast tumor lines from pleural effusions. In Vitro 12: 331, 1976. Siciliano MJ, et al. Mutually exclusive genetic signatures of human breast tumor cell lines with a common chromosomal marker. Cancer Res. 39: 919-922, 1979. PubMed: 427779 McLeskey SW, et al. MDA-MB-134 breast carcinoma cells overexpress fibroblast growth factor (FGF) receptors and are growth-inhibited by FGF ligands. Cancer Res. 54: 523-530, 1994. PubMed: 7506125 Cailleau R, et al. Breast tumor cell lines from pleural effusions. J. Natl. Cancer Inst. 53: 661-674, 1974. PubMed: 4412247 NTCC HTB-23(MDA-MB-134-VI)人乳腺导管癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-23(MDA-MB-134-VI)人乳腺导管癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-23(MDA-MB-134-VI)人乳腺导管癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC HTB-130(MDA-MB-436) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC HTB-130(MDA-MB-436)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-130(MDA-MB-436), MDA-MB-436, 人乳腺癌细胞 存储人: R Cailleau 种属来源: 人 组织来源: 乳房 疾病特征: 乳腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: L-15培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: HTB-130 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 10 D16S539: 9,11 D5S818: 13 D7S820: 10 THO1: 9.3 TPOX: 8 vWA: 14,20 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 1 PGM1, 1 PGM3, 1 参考文献: Brinkley BR, et al. Variations in cell form and cytoskeleton in human breast carcinoma cells in vitro. Cancer Res. 40: 3118-3129, 1980. PubMed: 7000337 Siciliano MJ, et al. Mutually exclusive genetic signatures of human breast tumor cell lines with a common chromosomal marker. Cancer Res. 39: 919-922, 1979. PubMed: 427779 Cailleau R, et al. Long-term human breast carcinoma cell lines of metastatic origin: preliminary characterization. In Vitro 14: 911-915, 1978. PubMed: 730202 Lan MS, et al. Polypeptide core of a human pancreatic tumor mucin antigen. Cancer Res. 50: 2997-3001, 1990. PubMed: 2334903 NTCC HTB-130(MDA-MB-436)人乳腺癌细胞特点和简介 该细胞源于一名43岁患有乳腺腺癌女性的胸腔积液。 细胞呈多形性，大多数细胞在间接免疫荧光染色时呈现与抗微管抗体的强烈反应。 NTCC HTB-130(MDA-MB-436)人乳腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-130(MDA-MB-436)人乳腺癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-130(MDA-MB-436)人乳腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC CRL-2315(HCC70) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC CRL-2315(HCC70)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2315(HCC70), HCC70, 人乳腺癌细胞 存储人: AF Gazdar, AK Virmani 种属来源: 人 组织来源: 乳房 疾病特征: 乳腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM，GIBCO，货号41500034)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-2315 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin:X CSF1PO:10,14 D13S317:12 D16S539:9,13 D5S818:12,13 D7S820:10,11 THO1:9 TPOX:10 vWA: 13,15 参考文献: Kao J, et al. Molecular profiling of breast cancer cell lines defines relevant tumor models and provides a resource for cancer gene discovery. PlosONE 4 (7): e 6146, 2009 Kim MS, et al. Breast cancer diagnosis using a microfluidic multiplexed immunohistochemistry platform. PlosONE 5 (5): e10441, 2010 Gazdar AF, et al. Characterization of paired tumor and non-tumor cell lines established from patients with breast cancer. Int. J. Cancer 78: 766-774, 1998. PubMed: 9833771 NTCC CRL-2315(HCC70)人乳腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2315(HCC70)人乳腺癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2315(HCC70)人乳腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC CRL-2330(HCC1569) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC CRL-2330(HCC1569)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2330(HCC1569), HCC1569, 人乳腺癌细胞 存储人: AF Gazdar, AK Virmani 种属来源: 人 组织来源: 乳房 疾病特征: 乳腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM，GIBCO，货号41500034)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-2330 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Ahmadian M, et al. Analysis of the FHIT gene and FRA3B region in sporadic breast cancer, preneoplastic lesions, and familial breast cancer probands. Cancer Res. 57: 3664-3668, 1997. PubMed: 9288768 Gazdar AF, et al. Characterization of paired tumor and non-tumor cell lines established from patients with breast cancer. Int. J. Cancer 78: 766-774, 1998. PubMed: 9833771 NTCC CRL-2330(HCC1569)人乳腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2330(HCC1569)人乳腺癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2330(HCC1569)人乳腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC CRL-2322(HCC1187) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC CRL-2322(HCC1187)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2322(HCC1187), HCC1187, 人乳腺癌细胞 存储人: AF Gazdar, AK Virmani 种属来源: 人 组织来源: 乳房 疾病特征: 乳腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM，GIBCO，货号41500034)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-2322 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 13 D13S317: 11 D16S539: 10 D5S818: 12 D7S820: 8,11 THO1: 6 TPOX: 8 vWA: 19 参考文献: Gazdar AF, et al. Characterization of paired tumor and non-tumor cell lines established from patients with breast cancer. Int. J. Cancer 78: 766-774, 1998. PubMed: 9833771 NTCC CRL-2322(HCC1187)人乳腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2322(HCC1187)人乳腺癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2322(HCC1187)人乳腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC HTB-19(BT-20) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC HTB-19(BT-20)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-19(BT-20), BT-20, 人乳腺癌细胞 存储人: EY Lasfargues 种属来源: 人 组织来源: 乳房 疾病特征: 乳腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM，GIBCO，货号41500034)，90%；FBS，10%。 产品目录号: HTB-19 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 11 D16S539: 11,14 D5S818: 12 D7S820: 10 THO1: 7,9.3 TPOX: 11 vWA: 16,17 同工酶: AK-1, 1-2 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1-2 PGM1, 1 PGM3, 1 备注: Nucleotide (GenBank) : M76744 Homo sapiens alternatively spliced biliary glycoprotein (BGP) mRNA, 3' end of cds. 参考文献: Sugarman BJ, et al. Recombinant human tumor necrosis factor-alpha: effects on proliferation of normal and transformed cells in vitro. Science 230: 943-945, 1985. PubMed: 3933111 Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Lan MS, et al. Polypeptide core of a human pancreatic tumor mucin antigen. Cancer Res. 50: 2997-3001, 1990. PubMed: 2334903 Castles CG, et al. Expression of a constitutively active estrogen receptor variant in the estrogen receptor-negative BT-20 human breast cancer cell line. Cancer Res. 53: 5934-5939, 1993. PubMed: 8261406 NTCC HTB-19(BT-20)人乳腺癌细胞特点和简介 该细胞1958年由E.Y. Lasfargues 和 L. Ozzello 建系，源自一位74岁白人女性的乳腺癌组织。该细胞表达WNT3和WNT78。TNF alpha抑制该细胞生长。该细胞雌激素受体阴性，但表达5＇外显子缺失的雌激素mRNA。 NTCC HTB-19(BT-20)人乳腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-19(BT-20)人乳腺癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-19(BT-20)人乳腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC HTB-127(MDA-MB-330) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC HTB-127(MDA-MB-330)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-127(MDA-MB-330), MDA-MB-330, 人浸润性小叶性乳腺癌 存储人: R Cailleau 种属来源: 人 组织来源: 乳房 疾病特征: 浸润性小叶性乳腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: HTB-127 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10 D13S317: 9 D16S539: 9,12 D5S818: 13 D7S820: 10,11 THO1: 8,9.3 TPOX: 8,11 vWA: 14,16 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1 PGM1, 1 PGM3, 1 参考文献: Brinkley BR, et al. Variations in cell form and cytoskeleton in human breast carcinoma cells in vitro. Cancer Res. 40: 3118-3129, 1980. PubMed: 7000337 Cruciger Q, et al. Morphological, biochemical and chromosomal characterization of breast tumor lines from pleural effusions. In Vitro 12: 331, 1976. Siciliano MJ, et al. Mutually exclusive genetic signatures of human breast tumor cell lines with a common chromosomal marker. Cancer Res. 39: 919-922, 1979. PubMed: 427779 Cailleau R, et al. Long-term human breast carcinoma cell lines of metastatic origin: preliminary characterization. In Vitro 14: 911-915, 1978. PubMed: 730202 NTCC HTB-127(MDA-MB-330)人浸润性小叶性乳腺癌接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-127(MDA-MB-330)人浸润性小叶性乳腺癌培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-127(MDA-MB-330)人浸润性小叶性乳腺癌培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC CRL-6323(B16-F1) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC CRL-6323(B16-F1)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-6323(B16-F1), B16-F1, 小鼠黑色素瘤细胞 种属来源: 小鼠 组织来源: 皮肤 疾病特征: 黑色素瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-6323 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 参考文献: Fidler IJ. Biological behavior of malignant melanoma cells correlated to their survival in vivo. Cancer Res. 35: 218-224, 1975. PubMed: 1109790 Fidler IJ, et al. Tumoricidal properties of mouse macrophages activated with mediators from rat lymphocytes stimulated with concanavalin A. Cancer Res. 36: 3608-3615, 1976. PubMed: 953987 Fidler IJ, Bucana C. Mechanism of tumor cell resistance to lysis by syngeneic lymphocytes. Cancer Res. 37: 3945-3956, 1977. PubMed: 908034 NTCC CRL-6323(B16-F1)小鼠黑色素瘤细胞特点和简介 该细胞源自黑色素瘤C57BL/6J荷瘤小鼠的皮肤,可产生黑色素。 NTCC CRL-6323(B16-F1)小鼠黑色素瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-6323(B16-F1)小鼠黑色素瘤细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-6323(B16-F1)小鼠黑色素瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC HTB-70(SK-MEL-5) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC HTB-70(SK-MEL-5)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-70(SK-MEL-5), SK-HEP-1, 人恶性黑色素瘤细胞 存储人: T Takahashi 种属来源: 人 组织来源: 皮肤 疾病特征: 恶性黑色素瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: HTB-70 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10,13 D13S317: 10,12 D16S539: 10,12 D5S818: 11,13 D7S820: 9,12 THO1: 6,9 TPOX: 11 vWA: 14,18 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1-2 PGM1, 1-2 PGM3, 1 参考文献: Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034 Pollack MS, et al. HLA-A, B, C and DR alloantigen expression on forty-six cultured human tumor cell lines. J. Natl. Cancer Inst. 66: 1003-1012, 1981. PubMed: 7017212 Carey TE, et al. Cell surface antigens of human malignant melanoma: mixed hemadsorption assays for humoral immunity to cultured autologous melanoma cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 73: 3278-3282, 1976. PubMed: 1067619 NTCC HTB-70(SK-MEL-5)人恶性黑色素瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-70(SK-MEL-5)人恶性黑色素瘤细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-70(SK-MEL-5)人恶性黑色素瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC HTB-72(SK-MEL-28) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC HTB-72(SK-MEL-28)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-72(SK-MEL-28), SK-MEL-28, 人恶性黑色素瘤细胞 存储人: T Takahashi 种属来源: 人 组织来源: 皮肤 疾病特征: 恶性黑色素瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: HTB-72 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 10,12 D13S317: 11,12 D16S539: 9,12 D5S818: 11,13 D7S820: 10,9.3 THO1: 7 TPOX: 8,12 vWA: 16,19 同工酶: AK-1, 1-2 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 PGM1, 1 PGM3, 1 备注: Nucleotide (GenBank) : D55649 Human mRNA for alpha mannosidase II isozyme, complete cds. Nucleotide (GenBank) : L28821 Homo sapiens alpha mannosidase II isozyme mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : NM_006122 Homo sapiens mannosidase, alpha, class 2A, member 2 (MAN2A2), mRNA. Nucleotide (GenBank) : AW067366 EST00008 RT-PCR products human melanoma Homo sapiens cDNA clone Mel8, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : AW067367 EST00009 RT-PCR products human melanoma Homo sapiens cDNA clone Mel10, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : AW067368 EST00010 RT-PCR products human melanoma Homo sapiens cDNA clone Mel12, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : AW067369 EST00011 RT-PCR products human melanoma Homo sapiens cDNA clone Mel15, mRNA sequence. 参考文献: Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034 Pollack MS, et al. HLA-A, B, C and DR alloantigen expression on forty-six cultured human tumor cell lines. J. Natl. Cancer Inst. 66: 1003-1012, 1981. PubMed: 7017212 Carey TE, et al. Cell surface antigens of human malignant melanoma: mixed hemadsorption assays for humoral immunity to cultured autologous melanoma cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 73: 3278-3282, 1976. PubMed: 1067619 Hay RJ, Caputo JL, Macy, ML, Eds. (1992) NTCC Quality Control Methods for Cell Lines. 2nd edition, Published by NTCC. Caputo JL. Biosafety procedures in cell culture. J. Tissue Culture Methods 11:223-227, 1988 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 4th ed.; U.S. Department of Health and Human Services ;1999. NTCC HTB-72(SK-MEL-28)人恶性黑色素瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-72(SK-MEL-28)人恶性黑色素瘤细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-72(SK-MEL-28)人恶性黑色素瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC HTB-64(Malme-3M) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC HTB-64(Malme-3M)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-64(Malme-3M), Malme-3M, 人恶性黑色素瘤细胞 存储人: J Fogh 种属来源: 人 组织来源: 皮肤 疾病特征: 恶性黑色素瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: HTB-64 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 12 D13S317: 8,13 D16S539: 9,12 D5S818: 11 D7S820: 9,12 THO1: 8 TPOX: 8,9 vWA: 15,16 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1-2 Me-2, 1 PGM1, 1 PGM3, 1 参考文献: Fogh J. Human tumor cells in vitro. New York: Plenum Press; 1975. Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034 Pollack MS, et al. HLA-A, B, C and DR alloantigen expression on forty-six cultured human tumor cell lines. J. Natl. Cancer Inst. 66: 1003-1012, 1981. PubMed: 7017212 NTCC HTB-64(Malme-3M)人恶性黑色素瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-64(Malme-3M)人恶性黑色素瘤细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-64(Malme-3M)人恶性黑色素瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC CRL-1404(SC-1) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC CRL-1404(SC-1)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-1404(SC-1), SC-1, 小鼠胚胎细胞 存储人: JW Hartley 种属来源: 小鼠 组织来源: 胚胎 疾病特征: 正常 细胞形态: 成纤维细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM，GIBCO，货号41500034)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-1404 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Hartley JW, Rowe WP. Clonal cells lines from a feral mouse embryo which lack host-range restrictions for murine leukemia viruses. Virology 65: 128-134, 1975. PubMed: 167514 NTCC CRL-1404(SC-1)小鼠胚胎细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-1404(SC-1)小鼠胚胎细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1404(SC-1)小鼠胚胎细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC CRL-1472(HT-1376) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC CRL-1472(HT-1376)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-1472(HT-1376), HT-1376, 人膀胱癌细胞 存储人: S Rasheed 种属来源: 人 组织来源: 膀胱 疾病特征: 膀胱癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-1472 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 9,11 D16S539: 11,14 D5S818: 11,12 D7S820: 9,12 THO1: 7,10 TPOX: 8 vWA: 15,18 同工酶: G6PD, B 参考文献: Rasheed S, et al. Human bladder carcinoma: characterization of two new tumor cell lines and search for tumor viruses. J. Natl. Cancer Inst. 58: 881-890, 1977. PubMed: 191628 Jameson P, Grossberg SE. Production of interferon by human tumor cell lines. Arch. Virol. 62: 209-219, 1979. PubMed: 229805 Bellet D, et al. Malignant transformation of nontrophoblastic cells is associated with the expression of chorionic gonadotropin beta genes normally transcribed in trophoblastic cells. Cancer Res. 57: 516-523, 1997. PubMed: 9012484 NTCC CRL-1472(HT-1376)人膀胱癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-1472(HT-1376)人膀胱癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1472(HT-1376)人膀胱癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC CRL-2266(SH-SY5Y) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC CRL-2266(SH-SY5Y)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2266(SH-SY5Y), SH-SY5Y, 人脑神经母细胞瘤 存储人: JL Biedler 种属来源: 人 组织来源: 脑 疾病特征: 脑神经母细胞瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM，GIBCO，货号41500034)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-2266 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11 D13S317: 11 D16S539: 8,13 D5S818: 12 D7S820: 7,10 THO1: 7,10 TPOX: 8,11 vWA: 14,18 参考文献: Ross RA, et al. Coordinate morphological and biochemical interconversion of human neuroblastoma cells. J. Natl. Cancer Inst. 71: 741-749, 1983. PubMed: 6137586 Biedler JL, et al. Multiple neurotransmitter synthesis by human neuroblastoma cell lines and clones. Cancer Res. 38: 3751-3757, 1978. PubMed: 29704 Ross RA, et al. Coordinate morphological and biochemical interconversion of human neuroblastoma cells. J. Natl. Cancer Inst. 71: 741-749, 1983. PubMed: 6137586 NTCC CRL-2266(SH-SY5Y)人脑神经母细胞瘤特点和简介 据报道，该细胞的密度可高达1×106 cells/cm2，具有中等水平的多巴胺β羟化酶的活性。 NTCC CRL-2266(SH-SY5Y)人脑神经母细胞瘤接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2266(SH-SY5Y)人脑神经母细胞瘤培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2266(SH-SY5Y)人脑神经母细胞瘤培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC CRL-11730(TOV-21G) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC CRL-11730(TOV-21G)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-11730(TOV-21G), TOV-21G, 人卵巢癌细胞 存储人: University of Montreal 种属来源: 人 组织来源: 卵巢 疾病特征: 卵巢癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-11730 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 13,15 D13S317: 11,12 D16S539: 10,12 D5S818: 12,13 D7S820: 12 THO1: 7,9.3 TPOX: 8,11 vWA: 17 参考文献: Mes-Masson AM, Provencher D. Primary cultures of normal and tumoral human ovarian epithelium. US Patent 5,710,038 dated Jan 20 1998 Provencher DM, et al. Characterization of four novel epithelial cancer cell lines. In Vitro Cell. Dev. Biol. Anim. 36: 357-361, 2000. PubMed: 10949993 Provencher DM, et al. Characterization of four novel epithelial cancer cell lines. In Vitro Cell. Dev. Biol. Anim. 36: 357-361, 2000. PubMed: 10949993 NTCC CRL-11730(TOV-21G)人卵巢癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-11730(TOV-21G)人卵巢癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-11730(TOV-21G)人卵巢癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC TIB-39(EL4) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC TIB-39(EL4)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC TIB-39(EL4), EL4, 小鼠淋巴瘤细胞 存储人: M Cohn 种属来源: 小鼠 组织来源: T 淋巴细胞 疾病特征: 淋巴瘤 细胞形态: 淋巴母细胞 生长特性: 悬浮生长 培养基: DMEM培养基，90%；FBS，10%。 产品目录号: TIB-39 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 参考文献: Ralph P. Retention of lymphocyte characteristics by myelomas and theta+-lymphomas: sensitivity to cortisol and phytohemagglutinin. J. Immunol. 110: 1470-1475, 1973. PubMed: 4541304 Old LJ, et al. The G (Gross) leukemia antigen. Cancer Res. 25: 813-819, 1965. PubMed: 4284252 Gorer PA. Studies in antibody response of mice to tumour inoculation. Br. J. Cancer 4: 372-379, 1950. PubMed: 14801344 Herberman RB. Serological analysis of cell surface antigens of tumors induced by murine leukemia virus. J. Natl. Cancer Inst. 48: 265-271, 1972. PubMed: 4119883 Ralph P, Nakoinz I. Inhibitory effects of lectins and lymphocyte mitogens on murine lymphomas and myelomas. J. Natl. Cancer Inst. 51: 883-890, 1973. PubMed: 4542714 NTCC TIB-39(EL4)小鼠淋巴瘤细胞特点和简介 EL4是从用9,10-二甲基-1,2-苯并蒽在C57BL小鼠中诱导的淋巴瘤中建立的。能抗0.1mM 氢化可的松，对20 μg/ml PHA敏感。 还有一个亚株(EL4.IL-2)可以生成高水平的IL-2。鼠痘病毒阴性。 NTCC TIB-39(EL4)小鼠淋巴瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC TIB-39(EL4)小鼠淋巴瘤细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC TIB-39(EL4)小鼠淋巴瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
ATCC CCL-159(IM-9) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
NTCC CCL-159(IM-9)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CCL-159(IM-9), IM-9, 人外周血B淋巴细胞 存储人: DN Buell 种属来源: 人 组织来源: 外周血 疾病特征: 正常 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: RPMI 1640，90%；FBS，10%。 产品目录号: CCL-159 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10,11 D13S317: 9,11 D16S539: 9,13 D5S818: 13 D7S820: 11,12 THO1: 6,9.3 TPOX: 11 vWA: 14,17 同工酶: ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1-2 Me-2, 2 PGM1, 1-2 PGM3, 0 备注: Nucleotide (GenBank) : X81121 H.sapiens mRNA for central cannabinoid receptor, short isoform. Nucleotide (GenBank) : X84369 H.sapiens RNA for heavy chain variable and constant regions (IM9-VH). Nucleotide (GenBank) : U07989 Human Burkitt's lymphoma immunoglobulin kappa light chain mRNA, partial cds. Nucleotide (GenBank) : U07985 Human myeloma immunoglobulin heavy chain Fd region V-D-J-CH1 mRNA, partial cds. 参考文献: Fahey JL, et al. Proliferation and differentiation of lymphoid cells: studies with human lymphoid cell lines and immunoglobulin synthesis. Ann. N.Y. Acad. Sci. 190: 221-234, 1971. PubMed: 5290016 Lesniak MA, et al. Binding of 125I-human growth hormone to specific receptors in human cultured lymphocytes. Characterization of the interaction and a sensitive radioreceptor assay. J. Biol. Chem. 249: 1661-1667, 1974. PubMed: 4361817 Van Obberghen E, et al. Cell surface receptors for insulin and human growth hormone. Effect of microtubule and microfilament modifiers. J. Biol. Chem. 251: 6844-6851, 1976. PubMed: 185222 Gavin JR, et al. Insulin-dependent regulation of insulin receptor concentrations: a direct demonstration in cell culture. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 71: 84-88, 1974. PubMed: 4359334 NTCC CCL-159(IM-9)人外周血B淋巴细胞特点和简介 可产生单克隆抗体。 NTCC CCL-159(IM-9)人外周血B淋巴细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CCL-159(IM-9)人外周血B淋巴细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-159(IM-9)人外周血B淋巴细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
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