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2017-02-15

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ATCC CRL-5807(NCI-H358) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-5807(NCI-H358),NCI-H358, 人非小细胞肺癌细胞 存储人: AF Gazdar, JD Minna 种属来源: 人 组织来源: 肺,细支气管,肺泡 疾病特征: 细支气管及肺泡癌;非小细胞肺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-5807 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 超微结构研究表明细胞质中有Clara细胞的特征结构 细胞表达主要的肺表面结合蛋白SP-A的蛋白和RNA。 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 8,12 D16S539: 12,13 D5S818: 10,12 D7S820: 10,11 THO1: 6 TPOX: 8,9 vWA: 17 参考文献: Brower M, et al. Growth of cell lines and clinical specimens of human non-small cell lung cancer in a serum-free defined medium. Cancer Res. 46: 798-806, 1986. PubMed: 3940644 Gazdar AF, et al. Peripheral airway cell differentiation in human lung cancer cell lines. Cancer Res. 50: 5481-5487, 1990. PubMed: 2386953 NCI-Navy Medical Oncology Branch Cell Line Supplement. J. Cell. Biochem. suppl. 24: 1996. Sordella R, et al. Gefitinib-sensitizing EGFR mutations in lung cancer activate anti-apoptotic pathways. Science 305: 1163-1167, 2004. PubMed: 15284455 NCI-H358人非小细胞肺癌细胞特点和简介 1981年从一位开始化疗之前的患者的肿瘤组织中分离建株。 超微结构研究表明细胞质中有Clara细胞的特征结构 细胞表达主要的肺表面结合蛋白SP-A的蛋白和RNA。 不表达SP-B和SP-C。 他们在软琼脂中的克隆形成效率为0.83%。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NCI-H358人非小细胞肺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NCI-H358人非小细胞肺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NCI-H358人非小细胞肺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-5807(NCI-H358)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2336(HCC1937) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2336(HCC1937), HCC1937, 人乳腺癌细胞 存储人: AF Gazdar, AK Virmani 种属来源: 人 组织来源: 乳房 疾病特征: 原发性导管癌; 3级, IIB期 细胞形态: 上皮细胞样,多角形 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2336 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 13 D16S539: 13,14 D5S818: 12 D7S820: 9,10 THO1: 6 TPOX: 11 vWA: 16,17 参考文献: Tomlinson GE, et al. Characterization of a breast cancer cell line derived from a germ-line BRCA1 mutation. Cancer Res. 58: 3237-3242, 1998. PubMed: 9699648 Gazdar AF, et al. Characterization of paired tumor and non-tumor cell lines established from patients with breast cancer. Int. J. Cancer 78: 766-774, 1998. PubMed: 9833771 HCC1937人乳腺癌细胞特点和简介 这株细胞1995年10月13日最初来源于原发性导管癌, 用了11.5个月建株。 肿瘤分类为TNM IIB期, 3级。 BRCA1分析表明这株细胞是BRCA1 5382C突变纯合的, 而来源于同一病人的类淋巴母细胞细胞株在这个突变位点上是杂合的。 另两个家庭成员也有这个突变; 一个同卵双生姐妹也患有乳腺癌。 这株细胞有一个后天的TP53突变, 而其野生型等位基因丢失; 一个PTEN基因的后天的纯合缺失, 以及多个与乳腺癌发病机理相关的位点上发生的杂合突变。 这株细胞Her2-neu和p53表达都呈阴性。 HCC1937的上皮细胞特异性标志上皮细胞糖蛋2(EGP2)和细胞角蛋白19都呈阳性。雌激素受体(ER)和孕酮(PR)表达阴性。 来源于同一患者的EBV转化的类淋巴母细胞株(HCC1937BL)也有供应, NTCC目录号为CRL-2337。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 HCC1937人乳腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 HCC1937人乳腺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 HCC1937人乳腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2336(HCC1937)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC HTB-132(MDA-MB-468) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC HTB-132(MDA-MB-468), MDA-MB-468, 人乳腺癌细胞 存储人: R Cailleau 种属来源: 人 组织来源: 乳房,乳腺 疾病特征: 乳腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: L-15培养基(GIBCO,货号41300039),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-132 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 12 D16S539: 9 D5S818: 12 D7S820: 8 THO1: 7 TPOX: 8,9 vWA: 18 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, A GLO-I, 1-2 Me-2, 1-2 PGM1, 1 PGM3, 2 参考文献: Brinkley BR, et al. Variations in cell form and cytoskeleton in human breast carcinoma cells in vitro. Cancer Res. 40: 3118-3129, 1980. PubMed: 7000337 Siciliano MJ, et al. Mutually exclusive genetic signatures of human breast tumor cell lines with a common chromosomal marker. Cancer Res. 39: 919-922, 1979. PubMed: 427779 Pathak S, et al. A human breast adenocarcinoma with chromosome and isoenzyme markers similar to those of the HeLa line. J. Natl. Cancer Inst. 62: 263-271, 1979. PubMed: 283262 Cailleau R, et al. Long-term human breast carcinoma cell lines of metastatic origin: preliminary characterization. In Vitro 14: 911-915, 1978. PubMed: 730202 Nigro JM, et al. Mutations in the p53 gene occur in diverse human tumour types. Nature 342: 705-707, 1989. PubMed: 2531845 Bates SE, et al. Expression of the transforming growth factor-alpha/epidermal growth factor receptor pathway in normal human breast epithelial cells. Endocrinology 126: 596-607, 1990. PubMed: 2294006 Avila MA, et al. Quercetin mediates the down-regulation of mutant p53 in the human breast cancer cell line MDA-MB468. Cancer Res. 54: 2424-2428, 1994. PubMed: 8162591 MDA-MB-468人乳腺癌细胞特点和简介 1977年由R. Cailleau等从一位患有乳腺癌的51岁黑人女性转移癌胸水中分离得到。虽然供组织者的G6PD等位基因杂合,但此细胞株始终表现为G6PD A表型。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 MDA-MB-468人乳腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 MDA-MB-468人乳腺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 MDA-MB-468人乳腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-132(MDA-MB-468)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC HTB-30(SK-BR-3) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC HTB-30(SK-BR-3), SK-BR-3, 人乳腺腺癌细胞 存储人: G Trempe, LJ Old 种属来源: 人 组织来源: 乳房,乳腺 疾病特征: 乳腺癌,腺癌取材转移灶,胸水 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基(GIBCO,货号12800017),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-30 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 11,12 D16S539: 9 D5S818: 9,12 D7S820: 9,12 THO1: 8,9 TPOX: 8,11 vWA: 17 同工酶: AK-1, 1-2 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 PGM1, 1-2 PGM3, 1 参考文献: Fogh J. Human tumor cells in vitro. New York: Plenum Press; 1975. Trempe GL. Human breast cancer in culture. Recent Results Cancer Res. 57: 33-41 , 1976. PubMed: 1013510 Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Fogh J, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 327080 Pollack MS, et al. HLA-A, B, C and DR alloantigen expression on forty-six cultured human tumor cell lines. J. Natl. Cancer Inst. 66: 1003-1012, 1981. PubMed: 7017212 Hudziak RM, et al. Monoclonal antibodies directed to the Her2 receptor. US Patent 5,677,171 dated Oct 14 1997 SK-BR-3人乳腺腺癌细胞特点和简介 1970年G. Trempe 和 L.J. Old从胸水中建立了这株细胞。 没有病毒颗粒。 超微结构特征包括微丝和桥粒,肝糖原颗粒,大溶酶体,成束的细胞质纤丝。 SK-BR-3细胞株过表达HER2/c-erb-2基因产物[30816]。 预定此细胞需至少提前两周。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 SK-BR-3人乳腺腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 SK-BR-3人乳腺腺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 SK-BR-3人乳腺腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-30(SK-BR-3)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-5822(NCI-N87) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-5822(NCI-N87), NCI-N87, 人胃癌细胞 存储人: J Park 种属来源: 人 组织来源: 胃 疾病特征: 胃癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-5822 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 8,12 D13S317: 8,11 D16S539: 9,13 D5S818: 12,13 D7S820: 10,11 THO1: 9 TPOX: 9,11 vWA: 15,16 参考文献: Park JG, et al. Characteristics of cell lines established from human gastric carcinoma. Cancer Res. 50: 2773-2780, 1990. PubMed: 2158397 NCI-Navy Medical Oncology Branch Cell Line Supplement. J. Cell. Biochem. suppl. 24: 1996. NCI-N87 is a gastric carcinoma cell line derived in 1976 by A. Gazdar and associates at the National Cancer Institute from a liver metastasis of a well differentiated carcinoma of the stomach taken prior to cytotoxic therapy. The tumor was passaged as a xenograft in athymic nude mice for three passages before the cell line was established. NCI-N87人胃癌细胞特点和简介 NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72, 并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。 它们的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体。 它们表达蕈毒碱胆碱受体。 没有证据表明存在N-myc, L-myc, myb和EGF受体基因的重组。 这个细胞株表达的c-myc和c-erb-B 2 RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达: N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 或胃泌激素释放肽。 报道NCI-N87 细胞的植板率为4.3%。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NCI-N87人胃癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NCI-N87人胃癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NCI-N87人胃癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-5822(NCI-N87)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-1504(ZR-75-30) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-1504(ZR-75-30), ZR-75-30, 人乳腺癌细胞 存储人: LW Engel 种属来源: 人 组织来源: 乳房,乳腺,上皮 疾病特征: 导管癌腹水转移灶 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1504 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10,11 D13S317: 10,11 D16S539: 9 D5S818: 12,13 D7S820: 11,12 THO1: 8,9 TPOX: 10,11 vWA: 18,19 参考文献: Engel LW, Young NA. Human breast carcinoma cells in continuous culture: a review. Cancer Res. 38: 4327-4339, 1978. PubMed: 212193 Engel LW, et al. Establishment and characterization of three new continuous cell lines derived from human breast carcinomas. Cancer Res. 38: 3352-3364, 1978. PubMed: 688225 Littlewood-Evans AJ, et al. The osteoclast-associated protease cathepsin K is expressed in human breast carcinoma. Cancer Res. 57: 5386-5390, 1997. PubMed: 9393764 ZR-75-30人乳腺癌细胞特点和简介 ZR-75-30源自一位47岁女性黑人更年期侵入性导管癌患者的腹水。 细胞定性为人,非-HeLa,恶性乳房上皮癌起始。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 ZR-75-30人乳腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 ZR-75-30人乳腺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 ZR-75-30人乳腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1504(ZR-75-30)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CCL-225(HCT-15) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CCL-225(HCT-15), HCT-15, 人结直肠腺癌细胞 存储人: DL Dexter 种属来源: 人 组织来源: 结直肠 疾病特征: 结直肠腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-225 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 12 D13S317: 8,11 D16S539: 12,13 D5S818: 13 D7S820: 10,12 THO1: 7,9.3 TPOX: 8,11 vWA: 18,19 同工酶: ES-D, 2 G6PD, B PEP-D, 1 PGD, A PGM1, 1-2 PGM3, 1 参考文献: Chen TR, et al. DLD-1 and HCT-15 cell lines derived separately from colorectal carcinomas have totally different chromosome changes but the same genetic origin. Cancer Genet. Cytogenet. 81: 103-108, 1995. PubMed: 7621404 Trainer DL, et al. Biological characterization and oncogene expression in human colorectal carcinoma cell lines. Int. J. Cancer 41: 287-296, 1988. PubMed: 3338874 Dexter DL, et al. N,N-dimethylformamide-induced alteration of cell culture characteristics and loss of tumorigenicity in cultured human colon carcinoma cells. Cancer Res. 39: 1020-1025, 1979. PubMed: 427742 Bender CM, et al. Inhibition of DNA methylation by 5-Aza-2'-deoxycytidine suppresses the growth of human tumor cell lines. Cancer Res. 58: 95-101, 1998. PubMed: 9426064 Vermeulen SJ, et al. Did the four human cancer cell lines DLD-1, HCT-15, HCT-8, and HRT-18 originate from one and the same patient?. Cancer Genet. Cytogenet. 107: 76-79, 1998. PubMed: 9809040 HCT-15人结直肠腺癌细胞特点和简介 DNA fingerprinting证据表明,这株细胞和DLD-1 (NTCC CCL-221) 来源于同一个人;但同工酶及细胞染色体组型分析仍存疑问。 细胞呈CSAp阴性(CSAp-)。 角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 HCT-15人结直肠腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 HCT-15人结直肠腺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 HCT-15人结直肠腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-225(HCT-15)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC HTB-31(C-33 A) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC HTB-31(C-33 A), C-33 A, 人子宫颈癌细胞 存储人: N Auersperg 种属来源: 人 组织来源: 子宫 疾病特征: 宫颈癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-31 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 13 D16S539: 13,14 D5S818: 11,12 D7S820: 10 THO1: 7,8 TPOX: 9 vWA: 18,20 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 2 PGM1, 1 PGM3, 1 参考文献: J. Natl. Cancer Inst. 32: 135-148, 1964. Yee C, et al. Presence and expression of human papillomavirus sequences in human cervical carcinoma cell lines. Am. J. Pathol. 119: 361-366, 1985. PubMed: 2990217 Scheffner M, et al. The state of the p53 and retinoblastoma genes in human cervical carcinoma cell lines. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 5523-5527, 1991. PubMed: 1648218 Hendricks DT, et al. FHIT gene expression in human ovarian, endometrial, and cervical cancer cell lines. Cancer Res. 57: 2112-2115, 1997. PubMed: 9187105 Kovelman R, et al. Enhanced transcriptional activation by E2 proteins from the oncogenic human papillomaviruses. J. Virol. 70: 7549-7560, 1996. PubMed: 8892874 C-33 A人子宫颈癌细胞特点和简介 C-33 A 细胞株是N. Auersperg从宫颈癌切片中建立的一系列细胞株(参见NTCC CRL-1594和NTCC CRL-1595)中的一株。 细胞一开始就表现出亚二倍体核型及上皮细胞形态。 连续传代可以观察到核型不稳定。 存在成视网膜细胞瘤蛋白(pRB),但大小不正常。 P53表达上调,且有一个273位密码子的点突变导致Arg -> Cys的替换。 人乳头瘤病毒DNA及RNA阴性。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 C-33 A人子宫颈癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 C-33 A人子宫颈癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 C-33 A人子宫颈癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-31(C-33 A)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-1658(NIH/3T3) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-1658(NIH/3T3),NIH/3T3, 小鼠胚胎细胞 种属来源: 小鼠 组织来源: 胚胎 细胞形态: 成纤维细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基(GIBCO,货号12800017),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-52 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 备注: Nucleotide (GenBank) : AF077527 Mus musculus syntenin mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : AF104358 Mus musculus synectin mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : NM_016807 Mus musculus syndecan binding protein (Sdcbp), mRNA. Nucleotide (GenBank) : AF068116 Mus musculus eIF4E-like protein 4E-LP mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : NM_019726 Mus musculus G protein pathway suppressor 2 (Gps2), mRNA. Nucleotide (GenBank) : U83327 Mus musculus CC chemokine receptor-5 (CCR5) gene, complete cds. Nucleotide (GenBank) : AF153696 Mus musculus G protein pathway suppressor 2 mRNA, complete cds. 参考文献: Jainchill JL, et al. Murine sarcoma and leukemia viruses: assay using clonal lines of contact-inhibited mouse cells. J. Virol. 4: 549-553, 1969. PubMed: 4311790 Andersson P, et al. A defined subgenomic fragment of in vitro synthesized Moloney sarcoma virus DNA can induce cell transformation upon transfection. Cell 16: 63-75, 1979. PubMed: 84715 Copeland NG, Cooper GM. Transfection by exogenous and endogenous murine retrovirus DNAs. Cell 16: 347-356, 1979. PubMed: 222457 Loffler S, et al. CD9, a tetraspan transmembrane protein, renders cells susceptible to canine distemper virus. J. Virol. 71: 42-49, 1997. PubMed: 8985321 Berson JF, et al. A seven-transmembrane domain receptor involved in fusion and entry of T-cell-tropic human immunodeficiency virus tyep 1 strains. J. Virol. 70: 6288-6295, 1996. PubMed: 8709256 Jones PL, et al. Tumor necrosis factor alpha and interleukin-1beta regulate the murine manganese superoxide dismutase gene through a complex intronic enhancer involving C/EBP-beta and NF-kappaB. Mol. Cell. Biol. 17: 6970-6981, 1997. PubMed: 9372929 Gonzalez Armas JC, et al. DNA immunization confers protection against murine cytomegalovirus infection. J. Virol. 70: 7921-7928, 1996. PubMed: 8892915 NIH/3T3小鼠胚胎细胞特点和简介 与原始的随机交配3T3和近交系BALB/c 3T3建株方法一样,NIH/3T3,是从NIH Swiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触抑制的连续细胞株。 为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株,建立的NIH/3T3细胞株又进行了五轮以上亚克隆。 这株细胞对DNA转化及转染研究十分有用。 检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。 在本库通过支原体检测。 NIH/3T3小鼠胚胎细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NIH/3T3小鼠胚胎细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NIH/3T3小鼠胚胎细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1658(NIH/3T3)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC HTB-169(WERI-Rb-1) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC HTB-169(WERI-Rb-1)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-169(WERI-Rb-1), WERI-Rb-1, 人视网膜神经胶质瘤细胞 存储人: TW Sery 种属来源: 人 组织来源: 眼睛,视网膜 疾病特征: 视网膜母细胞瘤 细胞形态: 圆形细胞聚集成葡萄状 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(MEM,GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-169 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 同工酶: ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 1 PGM1, 1 PGM3, 0 参考文献: McFall RC, et al. Characterization of a new continuous cell line derived from a human retinoblastoma. Cancer Res. 37: 1003-1010, 1977. PubMed: 844036 McFall RC, et al. Scanning electron microscopic observation of two retinoblastoma cell lines. Cancer Res. 38: 2827-2835, 1978. PubMed: 679190 Rostomily RC, et al. Expression of neurogenic basic helix-loop-helix genes in primitive neuroectodermal tumors. Cancer Res. 57: 3526-3531, 1997. PubMed: 9270024 WERI-Rb-1人视网膜神经胶质瘤细胞特点和简介 WERI-Rb-I细胞株是1974年R.M. McFall 和 T.W. Sery建立的两株人眼癌细胞系中的一株。 细胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。 扫描电镜显示在表面囊泡,板状伪足和微绒毛在数量上和频率上的改变。 细胞分化研究,肿瘤治疗的动物模型和生化评价都涉及这株细胞。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 WERI-Rb-1人视网膜神经胶质瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 WERI-Rb-1人视网膜神经胶质瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 WERI-Rb-1人视网膜神经胶质瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。

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NTCC HTB-33(ME-180)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-33(ME-180),ME-180, 人子宫颈表皮癌细胞 存储人: JA Sykes 种属来源: 人 组织来源: 子宫 疾病特征: 宫颈表皮样癌网膜转移灶 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: McCoy's 5A(SIGMA,货号M4892),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-33 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11 D13S317: 11,13 D16S539: 12,13 D5S818: 12 D7S820: 9,10 THO1: 8,9.3 TPOX: 8,10 vWA: 15,17 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1-2 G6PD, B GLO-I, 2 PGM1, 1-2 PGM3, 1 参考文献: Sugarman BJ, et al. Recombinant human tumor necrosis factor-alpha: effects on proliferation of normal and transformed cells in vitro. Science 230: 943-945, 1985. PubMed: 3933111 Sykes JA, et al. Some properties of a new epithelial cell line of human origin. J. Natl. Cancer Inst. 45: 107-122, 1970. PubMed: 4317734 Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034 Pater MM, Pater A. Human papillomavirus types 16 and 18 sequences in carcinoma cell lines of the cervix. Virology 145: 313-318, 1985. PubMed: 2992153 Yee C, et al. Presence and expression of human papillomavirus sequences in human cervical carcinoma cell lines. Am. J. Pathol. 119: 361-366, 1985. PubMed: 2990217 Pollack MS, et al. HLA-A, B, C and DR alloantigen expression on forty-six cultured human tumor cell lines. J. Natl. Cancer Inst. 66: 1003-1012, 1981. PubMed: 7017212 Reuter S, et al. Characterization of a novel human papillomavirus DNA in the cervical carcinoma cell line ME180. J. Virol. 65: 5564-5568, 1991. PubMed: 1716694 ME-180人子宫颈表皮癌细胞特点和简介 这株细胞来源于一个细胞集落不规则没有显著角质化的侵染性鳞状细胞癌。 单层培养的细胞间可以观察到带状连接,也注意到有细胞质张力丝。 1970年发现支原体污染并去除。 肿瘤坏死因子(TNF)α抑制ME-180的生长。 这株细胞含有人乳头瘤病毒(HPV)DNA,与HPV-39的同源性高于HPV-18。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 ME-180人子宫颈表皮癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 ME-180人子宫颈表皮癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌 储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 ME-180人子宫颈表皮癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。

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ATCC TIB-214(CTLL-2) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC TIB-214(CTLL-2)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC TIB-214(CTLL-2), CTLL-2, 小鼠T细胞 存储人: S Gillis 种属来源: 小鼠 组织来源: T细胞 疾病特征: 小鼠T细胞 细胞形态: 淋巴细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 产品目录号: TIB-214 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 细胞是依赖于IL-2的生长,可用于测定IL-2。 备注: Nucleotide (GenBank) : M27960 Mouse interleukin-4 receptor (secreted form) mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : M27959 Mouse (clone B-2) interleukin-4 receptor (membrane-bound form) mRNA, complete cds. 参考文献: Gillis S, Smith KA. Long term culture of tumour-specific cytotoxic T cells. Nature 268: 154-156, 1977. PubMed: 145543 Hu SX, et al. Development of an adenovirus vector with tetracycline-regulatable human tumor necrosis factor alpha gene expression. Cancer Res. 57: 3339-3343, 1997. PubMed: 9269991 Mazzaccaro RJ, et al. Major histocompatibility class I presentation of soluble antigen facilitated by Mycobacterium tuberculosis infection. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 11786-11791, 1996. PubMed: 8876215 Belani R, Weiner GJ. Expression of both B7-1 and CD28 contributes to the IL-2 responsiveness of CTLL-2 cells. Immunology 87: 271-274, 1996. PubMed: 8698390 Hay RJ, Caputo JL, Macy, ML, Eds. (1992) NTCC Quality Control Methods for Cell Lines. 2nd edition, Published by NTCC. Fleming, D.O., Richardson, J. H., Tulis, J.J. and Vesley, D., (1995) Laboratory Safety: Principles and Practice. Second edition, ASM press, Washington, DC. Caputo JL. Biosafety procedures in cell culture. J. Tissue Culture Methods 11:223-227, 1988 CTLL-2小鼠T细胞特点和简介 具有细胞毒作用的T-细胞株。 IL-2依赖型。 CTLL-2小鼠T细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 CTLL-2小鼠T细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌 储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 CTLL-2小鼠T细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。

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ATCC CRL-2285(Super Tube) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-2285(Super Tube)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2285(Super Tube), Super Tube, 狗肾细胞 存储人: RJ Klebe 种属来源: 狗 组织来源: 器官 疾病特征: 肾疾病;正常 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号12400024),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2285 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Klebe RJ, et al. Cyclic-AMP deficient MDCK cells form tubules. J. Cell. Biochem. 59: 453-462, 1995. PubMed: 8749715 Super Tube狗肾细胞特点和简介 从表观正常的成年雌性可卡犬中建立了细胞株MDCK (NTCC CCL-34),从中克隆建立了狗上皮样细胞株Super Tube。 当维持高细胞浓度时,Super tube形成大量的小管(据报道,24孔板的每孔铺7x105细胞,3天内就能形成小管)。 要形成小管,细胞需要每天两次换液以提供足够养分。 与原始细胞株相比,Super Tube的c-AMP的检测水平低得多,在forskolin刺激下读出的腺苷环化酶水平也低;它的跨上皮抗性也比Super Dome (NTCC CRL- 2286) 和 MDCK都低。 在本库通过支原体检测。 Super Tube狗肾细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 Super Tube狗肾细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌 储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 Super Tube狗肾细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。

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ATCC CCL-136(RD) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CCL-136(RD)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CCL-136(RD),RD, 人恶性胚胎横纹肌瘤细胞 存储人: RM McAllister 种属来源: 人 组织来源: 肌肉 疾病特征: 横纹肌肉瘤 细胞形态: 纺锤形细胞和大的多核细胞 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号12800017),90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-136 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞系可用于病毒的检测。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10,11 D13S317: 13 D16S539: 10,11 D5S818: 11 D7S820: 8,12 THO1: 9.3 TPOX: 9 vWA: 18 同工酶: G6PD, B 备注: Nucleotide (GenBank) : U09279 Human type XIX collagen (COL19A1) mRNA, partial cds. 参考文献: American Public Health Association. Compendium of methods for the microbiological examination of foods. 3rd ed.Washington, DC: American Public Health Association; 1992. McAllister RM, et al. Cultivation in vitro of cells derived from a human rhabdomyosarcoma. Cancer 24: 520-526, 1969. PubMed: 4241949 Chen TR, et al. Cell identity resolved. Nature 340: 106, 1989. PubMed: 2739733 Stratton MR, et al. Misidentified cell. Nature 337: 311-312, 1989. PubMed: 2911385 Gershwin ME, et al. Immunobiology of heterotransplanted human tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 58: 1455-1463, 1977. PubMed: 857033 Hahon N, Cooke KO. Primary virus-cell interactions in the immunofluorescence assay of Venezuelan equine encephalomyelitis virus. J. Virol. 1: 326, 1967. PubMed: 4918236 Guerin E, et al. Stromelysin-3 induction and interstitial collagenase repression by retinoic acid. J. Biol. Chem. 272: 11088-11095, 1997. PubMed: 9111003 Jeffers M, et al. Degradation of the Met tyrosine kinase receptor by the ubiquitin-proteasome pathway. Mol. Cell. Biol. 17: 799-808, 1997. PubMed: 9001234 RD人恶性胚胎横纹肌瘤细胞特点和简介 目前显示,这株细胞如果跟TE 671 (NTCC HTB-139)不一样,至少也是它的亲本。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。可产生肌红蛋白和肌球蛋白ATPase,可用作病毒检测。 RD人恶性胚胎横纹肌瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 RD人恶性胚胎横纹肌瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌 储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 RD人恶性胚胎横纹肌瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。

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NTCC HTB-52(SK-HEP-1)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-52(SK-HEP-1), SK-HEP-1, 人肝癌细胞 存储人: G Trempe, LJ Old, 1971 种属来源: 人 组织来源: 肝脏 疾病特征: 肝癌,肝腹水 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-52 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 核型: 该细胞为非整倍体细胞,染色体是亚三倍体。染色体N1, N13, N14, N15, 和N16与正常染色体相比数目不足。在细胞分裂中期,染色体N7,N12和N17与数目多于正常染色体数目。该细胞有8个代表性标记 del(1)(q21), der(1)t(1;2)(p36;q21), ?tdic(1;12)(p36;q24), ampl.t(4pter--->4q11::HSR::4q12--->4q24::HSR?::4q26--->4q35::2q15--->2pter), 13p+, 13p++, 14p+, t(14q15q), iso(14q), 19q+, del(3)(p14p24), 15p+. STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11,12 D13S317: 8,12 D16S539: 12 D5S818: 10,13 D7S820: 8,11 THO1: 7,9 TPOX: 9 vWA: 14,17 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1 Me-2, 1-2 PGM1, 2 PGM3, 1 备注: Nucleotide (GenBank) : S40179 pancreatic cholesterol esterase homolog {exon 10} [human, SK-Hep-I cells, NTCC HTB 52, Genomic, 84 nt]. 参考文献: Fogh J. Human tumor cells in vitro. New York: Plenum Press; 1975. Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034 Fogh J. Cultivation, characterization, and identification of human tumor cells with emphasis on kidney, testis, and bladder tumors. Natl. Cancer Inst. Monogr. 49: 5-9, 1978. PubMed: 571047 Heffelfinger SC, et al. SK HEP-1: a human cell line of endothelial origin. In Vitro Cell. Dev. Biol. 28A: 136-148, 1992. PubMed: 1371504 Gucev ZS, et al. Evidence for insulin-like growth factor (IGF)-independent transcriptional regulation of IGF binding protein-3 by growth hormone in SKHEP-1 human hepatocarcinoma cells. Endocrinology 138: 1464-1470, 1997. PubMed: 9075703 SK-HEP-1人肝癌细胞特点和简介 SK-HEP-1细胞系已被鉴定为内皮来源。 该细胞系为异倍体女性人(XX),染色体在亚三倍体范围内。 在裸鼠中,它能形成与肝癌相一致的大细胞癌。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 SK-HEP-1人肝癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 SK-HEP-1人肝癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 SK-HEP-1人肝癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7. 该细胞仅供科研使用。

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NTCC CRL-2055(NIT-1)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2055(NIT-1), NIT-1,NIT1 小鼠胰腺β细胞 存储人: EH Leiter 种属来源: 小鼠 组织来源: 胰腺 疾病特征: - 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2055 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 参考文献: Hamaguchi K, et al. NIT-1, a pancreatic beta-cell line established from a transgenic NOD/Lt mouse. Diabetes 40: 842-849, 1991. PubMed: 1647994 NTCC CRL-2055(NIT-1)小鼠胰腺β细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2055(NIT-1)小鼠胰腺β细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2055(NIT-1)小鼠胰腺β细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。

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NTCC CRL-2217(BpRc1)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2217(BpRc1), BpRc1, 小鼠肝癌细胞 存储人: J Whitlock 种属来源: 小鼠 组织来源: 肝脏 疾病特征: 肝癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2217 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Bernhard HP, et al. Expression of liver phenotypes in cultured mouse hepatoma cells: synthesis and secretion of serum albumin. Dev. Biol. 35: 83-96, 1973. PubMed: 4362668 NTCC CRL-2217(BpRc1)小鼠肝癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2217(BpRc1)小鼠肝癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2217(BpRc1)小鼠肝癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。

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ATCC TIB-166(M3/38.1.2.8 HL.2) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC TIB-166(M3/38.1.2.8 HL.2)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC TIB-166(M3/38.1.2.8 HL.2), M3/38.1.2.8 HL.2, 小鼠杂交瘤细胞 存储人: TA Springer 种属来源: 小鼠 组织来源: 杂交瘤 疾病特征: 杂交瘤 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: RPMI 1640,90%;FBS,10%。 产品目录号: TIB-166 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Ho MK, Springer TA. MAC-2, a novel 32,000 Mr mouse macrophage subpopulation-specific antigen defined by monoclonal antibodies. J. Immunol. 128: 1221-1228, 1982. PubMed: 6173426 Springer TA. Monoclonal antibody analysis of complex biological systems. Combination of cell hybridization and immunoadsorbents in a novel cascade procedure and its application to the macrophage cell surface. J. Biol. Chem. 256: 3833-3839, 1981. PubMed: 7217058 NTCC TIB-166(M3/38.1.2.8 HL.2)小鼠杂交瘤细胞特点和简介 可产生抗小鼠巨噬细胞的单克隆抗体Mac-2 NTCC TIB-166(M3/38.1.2.8 HL.2)小鼠杂交瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC TIB-166(M3/38.1.2.8 HL.2)小鼠杂交瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC TIB-166(M3/38.1.2.8 HL.2)小鼠杂交瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。

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ATCC TIB-210(2.43) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC TIB-210(2.43)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC TIB-210(2.43), 2.43, 小鼠杂交瘤细胞 存储人: FW Fitch 种属来源: 小鼠 组织来源: 杂交瘤 疾病特征: 杂交瘤 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: RPMI 1640,90%;FBS,10%。 产品目录号: TIB-210 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Sarmiento M, et al. IgG or IgM monoclonal antibodies reactive with different determinants on the molecular complex bearing lyt 2 antigen block T-cell mediated cytolysis in the absence of complement. J. Immunol. 125: 2665-2672, 1980. PubMed: 6159417 Sayles PC, Johnson LL. Intact immune defenses are required for mice to resist the ts-4 vaccine strain of Toxoplasma gondii. Infect. Immun. 64: 3088-3092, 1996. PubMed: 8757838 NTCC TIB-210(2.43)小鼠杂交瘤细胞特点和简介 可产生抗小鼠Lyt2.2的单克隆抗体。 NTCC TIB-210(2.43)小鼠杂交瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC TIB-210(2.43)小鼠杂交瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC TIB-210(2.43)小鼠杂交瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。

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2017-02-15

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ATCC CRL-8019(1116NS-3d) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-8019(1116NS-3d)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-8019(1116NS-3d),1116NS-3d, 小鼠杂交瘤细胞 存储人: Wistar Institute 种属来源: 小鼠 组织来源: 杂交瘤 疾病特征: 杂交瘤 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: RPMI 1640,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-8019 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Koprowski H, et al. Monoclonal hybridoma antibody specific for high molecular weight carcinoembryonic antigen. US Patent 4,349,528 dated Sep 14 1982 NTCC CRL-8019(1116NS-3d)小鼠杂交瘤细胞特点和简介 可产生单克隆抗体,抗原为癌胚抗原CEA。 NTCC CRL-8019(1116NS-3d)小鼠杂交瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-8019(1116NS-3d)小鼠杂交瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-8019(1116NS-3d)小鼠杂交瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。

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