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ATCC CRL-2922(EA.hy926) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CRL-2922(EA.hy926),EA.hy926, 人脐静脉细胞融合细胞 存储人: CS Edgell 种属来源: 人 组织来源: 体细胞融合子 疾病特征: 正常 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基(GIBCO,货号12800017),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2922 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 电镜照片显示Weibel-Palade小体的细胞质分布以及组织特异性的细胞器,分化的内皮细胞特性如血管生成,体内平衡/血栓形成,血压及炎症反应。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10,11,12 D13S317: 11 D16S539: 11,12 D5S818: 11 D7S820: 8,9,10 THO1: 6,8,9.3 TPOX: 8,9 vWA: 14,17 参考文献: Edgell CJ, et al. Permanent cell line expressing human factor VIII-related antigen established by hybridization. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80: 3734-3737, 1983. PubMed: 6407019 Bauer J, et al. In vitro model of angiogenesis using a human endothelium-derived permanent cell line: contributions of induced gene expression, G-proteins, and integrins. J. Cell. Physiol. 153: 437-449, 1992. PubMed: 1280276 Edgell CJ, et al. Endothelium specific Weibel-Palade bodies in a continuous human cell line, EA.hy926. In Vitro Cell. Dev. Biol. 26: 1167-1172, 1990. PubMed: 2079463 Rieber AJ, et al. Extent of differentiated gene expression in the human endothelium-derived EA.hy926 cell line. Thromb. Haemostasis 69: 476-480, 1993. PubMed: 8322270 NTCC CRL-2922(EA.hy926)人脐静脉细胞融合细胞特点和简介 在PEG胁迫下,将原代培养的人脐静脉细胞与抗硫鸟嘌呤的A549克隆株融合,构建了人脐静脉细胞株, EA.hy926。 融合子在HAT培养基上生长并以八因子相关抗原筛选。 EA.hy926已经过100次以上的群体倍增(PDLs)。 电镜照片显示Weibel-Palade小体的细胞质分布以及组织特异性的细胞器,分化的内皮细胞特性如血管生成,体内平衡/血栓形成,血压及炎症反应。 [PubMed: 6407019] [PubMed: 2079463] 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC CRL-2922(EA.hy926)人脐静脉细胞融合细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2922(EA.hy926)人脐静脉细胞融合细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2922(EA.hy926)人脐静脉细胞融合细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2922(EA.hy926)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CRL-5908(NCI-H1975) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CRL-5908(NCI-H1975), NCI-H1975, 人肺腺癌细胞 存储人: AF Gazdar, JD Minna 种属来源: 人 组织来源: 肺 疾病特征: 腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-5908 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 10,13 D16S539: 9,12 D5S818: 11,12 D7S820: 8,11 THO1: 7 TPOX: 8,11 vWA: 18 参考文献: NCI-Navy Medical Oncology Branch Cell Line Supplement. J. Cell. Biochem. suppl. 24: 1996. Sordella R, et al. Gefitinib-sensitizing EGFR mutations in lung cancer activate anti-apoptotic pathways. Science 305: 1163-1167, 2004. PubMed: 15284455 NTCC CRL-5908(NCI-H1975)人肺腺癌细胞特点和简介 这株细胞于1988年七月建株。 组织提供者是一位非吸烟人士。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC CRL-5908(NCI-H1975)人肺腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-5908(NCI-H1975)人肺腺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-5908(NCI-H1975)人肺腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-5908(NCI-H1975)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC HTB-144(JAR) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC HTB-144(JAR), JAR, 人胎盘绒毛癌细胞 存储人: RA Pattillo 种属来源: 人 组织来源: 胎盘 疾病特征: 绒毛绒膜癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-144 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 7,10 D13S317: 11 D16S539: 9,10 D5S818: 10,11 D7S820: 10,11 THO1: 6,7 TPOX: 8,11 vWA: 16,18 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 2 G6PD, B GLO-I, 1 PGM1, 1-2 PGM3, 1-2 参考文献: Pattillo RA, et al. The Jar cell line -- continuous human multihormone production and controls. In Vitro 6: 398-399, 1971. NTCC HTB-144(JAR)人胎盘绒毛癌细胞特点和简介 JAR细胞株来源于胎盘滋养层肿瘤。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC HTB-144(JAR)人胎盘绒毛癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-144(JAR)人胎盘绒毛癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-144(JAR)人胎盘绒毛癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-144(JAR)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC HTB-11(SK-N-SH) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC HTB-11(SK-N-SH), SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞 存储人: G Trempe, LJ Old 种属来源: 人 组织来源: 细胞 疾病特征: 脑神经母细胞瘤,转移部位骨髓。 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-11 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞已被用来作为一个目标细胞系在细胞介导的细胞毒性实验,是合适的转染宿主。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11 D13S317: 11 D16S539: 8,13 D5S818: 12 D7S820: 7,10 THO1: 7,10 TPOX: 8,11 vWA: 14,18 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1 Me-2, 2 PGM1, 1 PGM3, 1 参考文献: Gilbert LC, Wachsman JT. Characterization and partial purification of the plasminogen activator from human neuroblastoma cell line, SK-N-SH. A comparison with human urokinase. Biochim. Biophys. Acta 704: 450-460, 1982. PubMed: 7052133 Spengler BA, et al. Morphology and growth, tumorigenicity, and cytogenetics of human neuroblastoma cells established in vitro. In Vitro 8: 410, 1973. Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Bluestein HG. Neurocytotoxic antibodies in serum of patients with systemic lupus erythematosus. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 75: 3965-3969, 1978. PubMed: 279013 NTCC HTB-11(SK-N-SH)人神经母细胞瘤细胞特点和简介 SK-N-SH细胞系由J.L.Bieder建系,它与SK-N-MC所不同的是倍增时间较长且多巴胺-β-羟基酶水平较高。 SK-N-SH在细胞介导的细胞毒性试验中用作靶细胞系。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC HTB-11(SK-N-SH)人神经母细胞瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-11(SK-N-SH)人神经母细胞瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-11(SK-N-SH)人神经母细胞瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-11(SK-N-SH)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CRL-1830(Hepa 1-6) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CRL-1830(Hepa 1-6), Hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞 存储人: GJ Darlington 种属来源: 小鼠 组织来源: 肝 疾病特征: 肝癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基(GIBCO,货号12800017),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1830 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 参考文献: Darlington GJ. Liver cell lines. Methods Enzymol. 151: 19-38, 1987. PubMed: 3431441 Darlington GJ, et al. Expression of liver phenotypes in cultured mouse hepatoma cells. J. Natl. Cancer Inst. 64: 809-819, 1980. PubMed: 6102619 NTCC CRL-1830(Hepa 1-6)小鼠肝癌细胞特点和简介 C57/L小鼠中产生的BW7756小鼠肝癌的衍生株。 检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。 在本库通过支原体检测。 NTCC CRL-1830(Hepa 1-6)小鼠肝癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-1830(Hepa 1-6)小鼠肝癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1830(Hepa 1-6)小鼠肝癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1830(Hepa 1-6)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CCL-131(Neuro-2a) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CCL-131(Neuro-2a), Neuro-2a, 小鼠脑神经瘤细胞 存储人: RJ Klebe 种属来源: 小鼠 组织来源: 脑神经 疾病特征: 脑神经母细胞瘤 细胞形态: 神经和阿米巴样干细胞 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-131 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 备注: Nucleotide (GenBank) : AF209436 Mus musculus c-ret proto-oncogene mRNA, complete cds. 参考文献: Olmsted JB, et al. Isolation of microtubule protein from cultured mouse neuroblastoma cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 65: 129-136, 1970. PubMed: 5263744 Klebe RJ, Ruddle FH. Neuroblastoma: Cell culture analysis of a differentiating stem cell system. J. Cell Biol. 43: 69A, 1969. Naslavsky N, et al. Characterization of detergent-insoluble complexes containing the cellular prion protein and its scrapie isoform. J. Biol. Chem. 272: 6324-6331, 1997. PubMed: 9045652 Kaneko K, et al. Evidence for protein X binding to a discontinuous epitope on the cellular prion protein during scrapie prion propagation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94: 10069-10074, 1997. PubMed: 9294164 NTCC CCL-131(Neuro-2a)小鼠脑神经瘤细胞特点和简介 克隆Neuro-2A是由R.J.Klebe和F.H.Ruddle经A株白鼠的自生肿瘤建立。 该细胞产生大量微管蛋白,此蛋白在神经细胞中起应答轴浆流动的收缩系统作用。 在本库通过支原体检测。 NTCC CCL-131(Neuro-2a)小鼠脑神经瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系 。 NTCC CCL-131(Neuro-2a)小鼠脑神经瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基 混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。 第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作 台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后, 加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注 意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记 录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-131(Neuro-2a)小鼠脑神经瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生 请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞 因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担 。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞 仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再 次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免 费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时 可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技 术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞 的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-131(Neuro-2a)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CCL-228(SW480) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CCL-228(SW480),SW480, 人结肠腺癌细胞 存储人: A Leibovitz 种属来源: 人 组织来源: 直肠 疾病特征: 结直肠腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: L-15培养基(GIBCO,货号41300039),90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-228 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 13,14 D13S317: 12 D16S539: 13 D5S818: 13 D7S820: 8 THO1: 8 TPOX: 11 vWA: 16 同工酶: ES-D, 1 G6PD, B PEP-D, 1 PGD, A PGM1, 2 PGM3, 1 参考文献: Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034 Lelbovitz A, et al. Detection and analysis of a glucose 6-phosphate dehydrogenase phenotype B cell line contamination. J. Natl. Cancer Inst. 63: 635-645, 1979. PubMed: 288927 Adachi A, et al. Productive, persistent infection of human colorectal cell lines with human immunodeficiency virus. J. Virol. 61: 209-213, 1987. PubMed: 3640832 Schroy PC, et al. Detection of p21ras mutations in colorectal adenomas and carcinomas by enzyme-linked immunosorbent assay. Cancer 76: 201-209, 1995. PubMed: 8625092 Trainer DL, et al. Biological characterization and oncogene expression in human colorectal carcinoma cell lines. Int. J. Cancer 41: 287-296, 1988. PubMed: 3338874 NTCC CCL-228(SW480)人结肠腺癌细胞特点和简介 SW480源自原位直肠腺癌。 SW620 NTCC CCL-227源自同一病人一年后的淋巴结转移。 CSAp和直肠抗体3阴性。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。 p53基因第273位密码子的G -> A突变引起Arg -> His替代,309位密码子的C -> T突变导致Pro -> Ser替代。 细胞p53蛋白表达水平提高。 癌基因c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, myb, sis 和fos的表达呈阳性。 癌基因N-myc的表达未做检测。 不表达细胞溶解酶,一种与肿瘤入侵相关的金属蛋白酶。 有报道称该细胞表达GM-CSF。 ras 原癌基因的12位密码子有一个突变,可以用作PCR法检测该突变的阳性对照。 1978年十一月 A. Leibovitz将其提交给NTCC时已传代至第91代。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC CCL-228(SW480)人结肠腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系 。 NTCC CCL-228(SW480)人结肠腺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基 混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。 第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作 台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后, 加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注 意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记 录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-228(SW480)人结肠腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生 请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞 因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担 。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞 仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再 次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免 费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时 可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技 术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞 的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-228(SW480)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CRL-1978(ES-2) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CRL-1978(ES-2), ES-2, 人卵巢透明细胞癌 存储人: BI Sikic 种属来源: 人 组织来源: 卵巢 疾病特征: 透明细胞癌 细胞形态: 成纤维细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: McCOY's 5A(SIGMA,货号M4892),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1978 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10,15 D13S317: 11 D16S539: 11,13 D5S818: 11,13 D7S820: 11 THO1: 9.3 TPOX: 8,12 vWA: 16,17 参考文献: Lau DH, et al. Multifactorial mechanisms associated with broad cross-resistance of ovarian carcinoma cells selected by cyanomorpholino doxorubicin. Cancer Res. 51: 5181-5187, 1991. PubMed: 1717140 NTCC CRL-1978(ES-2)人卵巢透明细胞癌特点和简介 ES-2细胞系建自45岁女性黑人的外科肿瘤标本。 该肿瘤为低分化卵巢透明细胞癌。 该细胞最初生长在软琼脂中。 在裸鼠中成瘤。 该细胞对多种化疗药物包括doxorubicin, cisplatin, carmustine, etoposide 和cyanomorpholinodoxorubicin (MRA-CN)表现出低到中等的耐受性。 ES-2细胞表达低水平的P糖蛋白。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC CRL-1978(ES-2)人卵巢透明细胞癌接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联 系。 NTCC CRL-1978(ES-2)人卵巢透明细胞癌培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基 混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜) 。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作 台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后, 加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清 和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液 ,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记 录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1978(ES-2)人卵巢透明细胞癌培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生 请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞 因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担 。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞 仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再 次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免 费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时 可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技 术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞 的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1978(ES-2)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CRL-1642(LL/2 (LLC1)) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CRL-1642(LL/2 (LLC1)), LL/2 (LLC1), 小鼠肺癌细胞 存储人: JS Bertram 种属来源: 小鼠 组织来源: 肺 疾病特征: 肺癌 培养基: DMEM培养基(GIBCO,货号12800017),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1642 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞被广泛用作转移的模型,用于研究癌症化疗药物。 参考文献: Bertram JS, Janik P. Establishment of a cloned line of Lewis lung carcinoma cells adapted to cell culture. Cancer Lett. 11: 63-73, 1980. PubMed: 7226139 Sharma S, et al. T cell-derived IL-10 promotes lung cancer growth by suppressing both T cell and APC function. J. Immunol. 163: 5020-5028, 1999. PubMed: 10528207 NTCC CRL-1642(LL/2 (LLC1))小鼠肺癌细胞特点和简介 小鼠Lewis肺癌细胞。 在本库通过支原体检测。 NTCC CRL-1642(LL/2 (LLC1))小鼠肺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系 。 NTCC CRL-1642(LL/2 (LLC1))小鼠肺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基 混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。 第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作 台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后, 加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注 意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记 录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1642(LL/2 (LLC1))小鼠肺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生 请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞 因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担 。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞 仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再 次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免 费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时 可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技 术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞 的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1642(LL/2 (LLC1))标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CCL-44(EBTr) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CCL-44(EBTr), EBTr, 牛胚气管细胞 存储人: AJ Kniazeff, WA Nelson-Rees, NB Darby 种属来源: 牛 组织来源: 胚胎,气管 疾病特征: 正常 细胞形态: 成纤维细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-44 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Bolin SR, et al. Survey of cell lines in the American Type Culture Collection for bovine viral diarrhea virus. J. Virol. Methods 48: 211-221, 1994. PubMed: 7989438 Vassilev VB, et al. Authentic and chimeric full-length genomic cDNA clones of bovine viral diarrhea virus that yield infectious transcripts. J. Virol. 71: 471-478, 1997. PubMed: 8985373 Hay, R. J., Caputo, J. L., and Macy, M. L., Eds. (1992), NTCC Quality Control Methods for Cell Lines. 2nd edition, Published by NTCC. Caputo, J. L., Biosafety procedures in cell culture. J. Tissue Culture Methods 11:223-227, 1988. NTCC CCL-44(EBTr)牛胚气管细胞特点和简介 牛痢疾病毒(BVDV)阴性。 在本库通过支原体检测。 NTCC CCL-44(EBTr)牛胚气管细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系 。 NTCC CCL-44(EBTr)牛胚气管细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基 混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。 第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作 台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后, 加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注 意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记 录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-44(EBTr)牛胚气管细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生 请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞 因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担 。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞 仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再 次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免 费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时 可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技 术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞 的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-44(EBTr)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CRL-2271(SK-N-BE) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CRL-2271(SK-N-BE), SK-N-BE, 人神经母细胞瘤细胞 存储人: JL Biedler 种属来源: 人 组织来源: 脑 疾病特征: 神经母细胞瘤,骨髓转移灶 细胞形态: 神经细胞 生长特性: 贴壁/悬浮混合 培养基: MEM培养基(GIBCO,货号41500034),45%;FBS,10%;F-12培养基,45% 产品目录号: CRL-2271 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 10 D13S317: 11 D16S539: 9,11 D5S818: 12 D7S820: 9,10 THO1: 6,7 TPOX: 8,11 vWA: 18 参考文献: Biedler JL, Spengler BA. A novel chromosome abnormality in human neuroblastoma and antifolate-resistant Chinese hamster cell lives in culture. J. Natl. Cancer Inst. 57: 683-695, 1976. PubMed: 62055 Barnes EN, et al. The fine structure of continuous human neuroblastoma lines SK-N-SH, SK- N-BE(2), and SK-N-MC. In Vitro 17: 619-131, 1981. PubMed: 7327593 Biedler JL, Spengler BA. Metaphase chromosome anomaly: association with drug resistance and cell-specific products. Science 191: 185-187, 1976. PubMed: 942798 Biedler JL, et al. Multiple neurotransmitter synthesis by human neuroblastoma cell lines and clones. Cancer Res. 38: 3751-3757, 1978. PubMed: 29704 NTCC CRL-2271(SK-N-BE)人神经母细胞瘤细胞特点和简介 1972年11月从一们多次化疗及放疗的扩散性神经母细胞瘤患儿骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神经母细胞瘤细胞株。 该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。 有报道称SK-N-BE(2)细胞的饱和浓度超过1x106细胞/平方厘米。细胞形态多样,有的有长突触,有的呈上皮细胞样。 细胞会聚集,形成团块并浮起。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC CRL-2271(SK-N-BE)人神经母细胞瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2271(SK-N-BE)人神经母细胞瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2271(SK-N-BE)人神经母细胞瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2271(SK-N-BE)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC HTB-177(NCl-H460) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC HTB-177(NCl-H460), NCl-H460, 人大细胞肺癌细胞 存储人: AF Gazdar, JD Minna 种属来源: 人 组织来源: 肺 疾病特征: 肋膜渗出癌;大细胞肺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-177 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 13 D16S539: 9 D5S818: 9,10 D7S820: 9,12 THO1: 9.3 TPOX: 8 vWA: 17 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1-2 Me-2, 1 PGM1, 1 PGM3, 1 参考文献: Banks-Schlegel SP, et al. Intermediate filament and cross-linked envelope expression in human lung tumor cell lines. Cancer Res. 45: 1187-1197, 1985. PubMed: 2578876 Takahashi T, et al. p53: A frequent target for genetic abnormalities in lung cancer. Science 246: 491-494, 1989. PubMed: 2554494 Brower M, et al. Growth of cell lines and clinical specimens of human non-small cell lung cancer in a serum-free defined medium. Cancer Res. 46: 798-806, 1986. PubMed: 3940644 Geiger T, et al. Antitumor activity of a PKC-alpha antisense oligonucleotide in combination with standard chemotherapeutic agents against various human tumors transplanted into nude mice. Anticancer Drug Des. 13: 35-45, 1998. PubMed: 9474241 NTCC HTB-177(NCl-H460)人大细胞肺癌细胞特点和简介 NCI-H460细胞株从一位大细胞肺癌患者的胸水中建立。 细胞表达的p53 mRNA易于检测,其水平与正常肺细胞相当,未表现出DNA总体结构异常。 角蛋白和波形蛋白纤维染色阳性,神经丝三联体蛋白阴性。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC HTB-177(NCl-H460)人大细胞肺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-177(NCl-H460)人大细胞肺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-177(NCl-H460)人大细胞肺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-177(NCl-H460)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CRL-2578(RKO-E6) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CRL-2578(RKO-E6), RKO-E6, 人结肠癌转基因细胞 存储人: MC Hollander, AJ Fornace 种属来源: 人 组织来源: 结肠 疾病特征: 结肠癌,转染插入到pCMV中的HPV E6 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2578 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 应用: 该细胞可以用其亲本细胞一起使用 参考文献: Smith ML, et al. Involvement of the p53 tumor suppressor in repair of u.v.-type DNA damage. Oncogene 10: 1053-1059, 1995. PubMed: 7700629 Smith ML, et al. Antisense GADD45 expression results in decreased DNA repair and sensitizes cells to u.v.-irradiation or cisplatin. Oncogene 13: 2255-2263, 1996. PubMed: 8950993 Bhat MK, et al. Tumor suppressor p53 is a negative regulator in thyroid hormone receptor signaling pathways. J. Biol. Chem. 272: 28989-28993, 1997. PubMed: 9360971 Kessis TD, et al. Human papillomavirus 16 E6 expression disrupts the p53-mediated cellular response to DNA damage. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 3988-3992, 1993. PubMed: 8387205 NTCC CRL-2578(RKO-E6)人结肠癌转基因细胞特点和简介 RKO-E6细胞系是用脂质体法转染pCMV-E6的结肠癌RKO细胞系。 该细胞含有稳定整合受控於巨细胞病毒启动子的人乳头状病毒(HPV)E6癌基因。 RKO-E6细胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的细胞参数改变p53介导的转录和凋亡等。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC CRL-2578(RKO-E6)人结肠癌转基因细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2578(RKO-E6)人结肠癌转基因细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2578(RKO-E6)人结肠癌转基因细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2578(RKO-E6)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC HTB-35(SiHa) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC HTB-35(SiHa), SiHa, 人子宫颈鳞癌细胞 存储人: Y Ito 种属来源: 人 组织来源: 子宫 疾病特征: 子宫颈鳞癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-35 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 11 D16S539: 12 D5S818: 9 D7S820: 10 THO1: 6,9 TPOX: 8 vWA: 14,17 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 2 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 1 PGM1, 1 PGM3, 1 备注: Nucleotide (GenBank) : AF001600 Human papillomavirus type 16 integrated SiHa HPV-16 variant DNA, capsid protein gene, complete cds, and flanking cellular DNA. Nucleotide (GenBank) : AF001599 Human papillomavirus type 16 integrated SiHa HPV-16 variant, replication protein gene, complete cds, and flanking cellular sequence. 参考文献: Baker CC, et al. Structural and transcriptional analysis of human papillomavirus type 16 sequences in cervical carcinoma cell lines. J. Virol. 61: 962-971, 1987. PubMed: 3029430 Pater MM, Pater A. Human papillomavirus types 16 and 18 sequences in carcinoma cell lines of the cervix. Virology 145: 313-318, 1985. PubMed: 2992153 Yee C, et al. Presence and expression of human papillomavirus sequences in human cervical carcinoma cell lines. Am. J. Pathol. 119: 361-366, 1985. PubMed: 2990217 Friedl F, et al. Studies on a new human cell line (SiHa) derived from carcinoma of uterus. I. Its establishment and morphology. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 135: 543-545, 1970. PubMed: 5529598 Scheffner M, et al. The state of the p53 and retinoblastoma genes in human cervical carcinoma cell lines. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 5523-5527, 1991. PubMed: 1648218 NTCC HTB-35(SiHa)人子宫颈鳞癌细胞特点和简介 该细胞系建自一个日本病人的外科手术的原位组织样品。 电镜观察表明在细胞连接处有典型的桥粒,在胞质中有丰富的张力丝。 在裸鼠中,此细胞能形成低分化的表皮样癌(三级)。 癌基因: PRB和P53阳性。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC HTB-35(SiHa)人子宫颈鳞癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-35(SiHa)人子宫颈鳞癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-35(SiHa)人子宫颈鳞癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-35(SiHa)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CRL-11372(hFOB 1.19) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CRL-11372(hFOB 1.19), hFOB 1.19, 人转染成骨细胞 存储人: Harris, TC Spelsberg 种属来源: 人 组织来源: 成骨细胞 疾病特征: 正常 培养基: D-MEM/F-12培养基(GIBCO,货号12400024),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-11372 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 应用: 该细胞提供了一个同质的,快速增殖的模型系统,用于研究正常的人成骨细胞分化,成骨细胞的生理,激素,生长因子,和其他细胞因子对成骨细胞的功能和分化的影响。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10,13 D13S317: 11,12 D16S539: 9,13 D5S818: 11,12 D7S820: 8,10 THO1: 7,9.3 TPOX: 11 vWA: 16,18 参考文献: Harris SA, Spelsberg TC. Immortalized human fetal osteoblastic cells. US Patent 5,681,701 dated Oct 28 1997 Harris SA, et al. Development and characterization of a conditionally immortalized human fetal osteoblastic cell line. J. Bone Miner. Res. 10: 178-186, 1995. PubMed: 7754797 Jacobs CR, et al. Differential effect of steady versus oscillating flow on bone cells. J. Biomech. 31: 969-976, 1998. PubMed: 9880053 NTCC CRL-11372(hFOB 1.19)人转染成骨细胞特点和简介 在0.6mg/mlNeomycin_1.html' target='_blank'>新霉素G418存在下,用温度敏感的表达载体pUCSVisA58转染自然流产的胎儿四肢组织,建立了此细胞系。 在许可温度33.5oC下细胞分裂很快,而在限制温度39.5oC下细胞极少分裂或不分裂。 这些细胞具有分化为表达造骨细胞表型的成熟造骨细胞的能力。 这些细胞提供了一个同质化的快速增殖模型系统,用于研究正常人造骨细胞的分化,造骨细胞生理和激素,生长因子,和对造骨细胞的功能及分化有影响的细胞因子。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC CRL-11372(hFOB 1.19)人转染成骨细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-11372(hFOB 1.19)人转染成骨细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-11372(hFOB 1.19)人转染成骨细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-11372(hFOB 1.19)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CRL-1840(OK) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CRL-1840(OK), OK, 负鼠肾细胞 存储人: MM Miller 种属来源: 负鼠 组织来源: 肾 疾病特征: 正常 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1840 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 备注: Nucleotide (GenBank) : X95475 D.virginiana mRNA for rBAT protein. 参考文献: Yagil C, et al. Insulin binding, internalization, and degradation by a cultured kidney cell line. Am. J. Physiol. 254: E601-E608, 1988. PubMed: 2834959 Cole JA, et al. Regulation of sodium-dependent phosphate transport by parathyroid hormone in opossum kidney cells: adenosine 3', 5'-monophosphate-dependent and -independent mechanisms. Endocrinology 122: 2981-2989, 1988. PubMed: 2836179 Nakai M, et al. Atrial natriuretic factor inhibits phosphate uptake in opossum kidney cells as a model of renal proximal tubules. Biochem. Biophys. Res. Commun. 152: 1416-1420, 1988. PubMed: 2837187 Cheng L, et al. Alpha-2-adrenergic modulation of the parathyroid hormone-inhibition of phosphate uptake in cultured renal (OK) cells. Biochem. Biophys. Res. Commun. 155: 74-82, 1988. PubMed: 2843189 NTCC CRL-1840(OK)负鼠肾细胞特点和简介 此细胞株最初是为研究X染色体失活时提供X染色体,随后发现它是极好的肾近曲小管上皮细胞的细胞培养模型。此细胞在培养时表达多种受体,并被广泛地用作研究这些受体的模型。 在本库通过支原体检测。 NTCC CRL-1840(OK)负鼠肾细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-1840(OK)负鼠肾细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1840(OK)负鼠肾细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1840(OK)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CCL-243(K-562) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CCL-243(K-562), K-562, 人慢性髓原白血病细胞 存储人: HT Holden 种属来源: 人 组织来源: 骨髓 疾病特征: 慢性骨髓性白血病(CML) 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: IMDM培养基(GIBCO,货号12200036),90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-243 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 9,10 D13S317: 8 D16S539: 11,12 D5S818: 11,12 D7S820: 9,11 THO1: 9.3 TPOX: 8,9 vWA: 16 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 0 PGM1, 0 PGM3, 1 备注: Nucleotide (GenBank) : X96391 H.sapiens mRNA for alternatively spliced isoform of CLC-6 chloride channel. Nucleotide (GenBank) : AF146430 Homo sapiens cell-line K562 sodium/hydrogen exchanger isoform 1 mRNA, complete cds. 参考文献: Koeffler HP, Golde DW. Human myeloid leukemia cell lines: a review. Blood 56: 344-350, 1980. PubMed: 6996765 Ortaldo JR, et al. Specificity of natural cytotoxic reactivity of normal human lymphocytes against a myeloid leukemia cell line. J. Natl. Cancer Inst. 59: 77-82, 1977. PubMed: 69036 Lozzio CB, Lozzio BB. Human chronic myelogenous leukemia cell-line with positive Philadelphia chromosome. Blood 45: 321-334, 1975. PubMed: 163658 Lozzio BB, Lozzio CB. Properties and usefulness of the original K-562 human myelogenous leukemia cell line. Leuk. Res. 3: 363-370, 1979. PubMed: 95026 Andersson LC, et al. K562--a human erythroleukemic cell line. Int. J. Cancer 23: 143-147, 1979. PubMed: 367973 Lozzio BB, et al. A multipotential leukemia cell line (K-562) of human origin. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 166: 546-550, 1981. PubMed: 7194480 NTCC CCL-243(K-562)人慢性髓原白血病细胞特点和简介 连续细胞株K-562由Lozzio从一位临终的53岁女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立。 细胞被归入高度未分化的粒性白细胞类。 Anderson等对其表面膜性质的研究表明,K-562是一株人类红白血病细胞。 K-562细胞株在自然杀伤分析中广泛作为高敏感的体外受体。 See Pross等将它用于NK细胞的体外详细检测,包括NK细胞活性的数学量化。 K-562母细胞是多能性,造血恶性细胞,它能自发分化成可识别的红血球祖细胞、粒性白细胞、单核细胞等。它是EBNA阴性的。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC CCL-243(K-562)人慢性髓原白血病细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CCL-243(K-562)人慢性髓原白血病细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-243(K-562)人慢性髓原白血病细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-243(K-562)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC HTB-46(Caki-1) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC HTB-46(Caki-1), Caki-1, 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞 存储人: J Fogh 种属来源: 人 组织来源: 肾 疾病特征: 肾透明细胞癌皮肤转移 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: McCOY's 5A(SIGMA,货号M4892),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-46 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10,11 D13S317: 11,12 D16S539: 12 D5S818: 11,12 D7S820: 8,12 THO1: 6,8 TPOX: 8,11 vWA: 15,17 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1-2 G6PD, B GLO-I, 1-2 Me-2, 2 PGM1, 1 PGM3, 1-2 参考文献: Fogh J. Human tumor cells in vitro. New York: Plenum Press; 1975. Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034 Pollack MS, et al. HLA-A, B, C and DR alloantigen expression on forty-six cultured human tumor cell lines. J. Natl. Cancer Inst. 66: 1003-1012, 1981. PubMed: 7017212 Fogh J. Cultivation, characterization, and identification of human tumor cells with emphasis on kidney, testis, and bladder tumors. Natl. Cancer Inst. Monogr. 49: 5-9, 1978. PubMed: 571047 NTCC HTB-46(Caki-1)人肾透明细胞癌皮肤转移细胞特点和简介 超微结构中包含许多微绒毛,少许微丝,许多小线粒体,充分发育的高尔基休和内质网,许多脂滴和多层体,次级溶酶体,没有发现病毒颗粒。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC HTB-46(Caki-1)人肾透明细胞癌皮肤转移细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-46(Caki-1)人肾透明细胞癌皮肤转移细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-46(Caki-1)人肾透明细胞癌皮肤转移细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-46(Caki-1)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC CRL-2836(K7M2 wt) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC CRL-2836(K7M2 wt), K7M2 wt, 小鼠骨肉瘤成骨细胞 存储人: C Khanna 种属来源: 小鼠 组织来源: 骨 疾病特征: 骨肉瘤 细胞形态: 成骨细胞 培养基: DMEM培养基(GIBCO,货号12800017),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2836 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 参考文献: Khanna C, et al. An orthotopic model of murine osteosarcoma with clonally related variants differing in pulmonary metastatic potential. Clin. Exp. Metastasis 18: 261-271, 2000. PubMed: 11315100 Khanna C, et al. Metastasis-associated differences in gene expression in a murine model of osteosarcoma. Cancer Res. 61: 3750-3759, 2001. PubMed: 11325848 Khanna C, et al. The membrane-cytoskeleton linker ezrin is necessary for osteosarcoma metastasis. Nat. Med. 10: 182-186, 2004. PubMed: 14704791 The K7M2 wt cell line was derived by intra-osseous injection of the K7 murine osteosarcoma cell line to the proximal tibia of a BALB/c mouse. The resultant primary tumor spontaneously metastasized to the lungs. A pulmonary metastasis was removed from the lung and then surgically implanted to a paraosteal tibial muscle flap of a naïve mouse. This cycle of implantation of pulmonary metastasis to paraosteal tibial muscle flap sites was repeated, resulting in the K7M2 primary tumor. This tumor was dissociated to a single cell suspension to create the K7M2 wt cell line NTCC CRL-2836(K7M2 wt)小鼠骨肉瘤成骨细胞特点和简介 抗原表达: CD31 阳性 [PubMed:1315100] 产物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表达显示其骨家族细胞特性。 在本库通过支原体检测。 NTCC CRL-2836(K7M2 wt)小鼠骨肉瘤成骨细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2836(K7M2 wt)小鼠骨肉瘤成骨细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2836(K7M2 wt)小鼠骨肉瘤成骨细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2836(K7M2 wt)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
ATCC HTB-3(SCaBER) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心
细胞名称: NTCC HTB-3(SCaBER), SCaBER, 人膀胱鳞癌细胞 存储人: C O'Toole 种属来源: 人 组织来源: 膀胱 疾病特征: 鳞癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-3 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,13 D13S317: 11,12 D16S539: 11,12 D5S818: 12,13 D7S820: 8,10 THO1: 7,9 TPOX: 9,11 vWA: 16 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, A GLO-I, 1-2 Me-2, 2 PGM1, 1-2 PGM3, 1-2 参考文献: O'Toole CHuman bladder cancer lines: HLA Class I and Class II antigen expression and susceptibility to cytostatic and cytotoxic effects in vitroIn: O'Toole CIn vitro models for cancer researchvol. IVBoca Raton, FLCRC Presspp. 103-125. O'Toole C, et al. A cell line (SCABER) derived from squamous cell carcinoma of the human urinary bladder. Int. J. Cancer 17: 707-714, 1976. PubMed: 947851 Fogh J. Cultivation, characterization, and identification of human tumor cells with emphasis on kidney, testis, and bladder tumors. Natl. Cancer Inst. Monogr. 49: 5-9, 1978. PubMed: 571047 NTCC HTB-3(SCaBER)人膀胱鳞癌细胞特点和简介 源于一位58岁患有膀胱鳞癌的白人男性患者,含有不常见的G6PD A型同工酶。 NTCC HTB-3(SCaBER)人膀胱鳞癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-3(SCaBER)人膀胱鳞癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-3(SCaBER)人膀胱鳞癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-3(SCaBER)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载
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