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pET30a载体基本信息
EMD Biosciences (Novagen) |
pET30a, pet 30a |
大肠杆菌蛋白表达 |
高 |
多克隆位点,限制性内切酶 |
5422 bp |
T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
N-His, N-S, N-Thrombin, N-EK, C-His |
卡那 |
pET30a, b, c的差异只存在于多克隆位点,其他位点不存在。 |
69909-3 |
瞬时表达 |
组成型 |
非病毒 |
pET30a载体质粒图谱和多克隆位点信息
pET30a载体简介
pET-30a(+)载体携带有一个N端的His标签/Thrombin酶切位点/ S标签/ EK蛋白酶切标签以及一个可选择的C端His标签。
载体的多克隆位点见上面的图谱。需要注意的是图谱中的核苷酸编码顺序是以pBR322载体的复制方向为正方向,所以T7表达区域在图谱中是处于反向的位 置。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。
pET30a载体序列
DEFINITION pET-30a(+)
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT ORIGDB|GenBank
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5422
/organism="pET-30a(+)"
/mol_type="other DNA"
terminator complement(1..129)
/label="T7_terminator"
misc_feature 69..87
/label="T7_Terminal_primer"
misc_feature complement(219..230)
/label="EK"
misc_feature 302..1908
/label="lacI"
CDS 327..1076
/label="ORF frame 3"
misc_feature complement(356..372)
/label="T7_transl_en_RBS"
misc_feature complement(390..417)
/label="lacO"
promoter complement(417..435)
/label="T7_promoter"
gene 471..734
/label="tet (300 - 563)"
/gene="tet (300 - 563)"
misc_feature complement(523..542)
/label="pBRrevBam_primer"
CDS 949..1908
/label="ORF frame 1"
gene 1967..2242
/label="tet (576 - 851)"
/gene="tet (576 - 851)"
misc_feature 2717..2908
/label="ROP"
misc_feature complement(2902..2924)
/label="pGEX_3_primer"
rep_origin complement(3323..3942)
/label="pBR322_origin"
gene 4048..4863
/label="KanR2"
/gene="KanR2"
CDS 4048..4863
/label="ORF frame 1"
ORIGIN
1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
181 cgacggagct cgaattcgga tccgatatca gccatggcct tgtcgtcgtc gtcggtaccc
241 agatctgggc tgtccatgtg ctggcgttcg aatttagcag cagcggtttc tttcatacca
301 gaaccgcgtg gcaccagacc agaagaatga tgatgatgat ggtgcatatg tatatctcct
361 tcttaaagtt aaacaaaatt atttctagag gggaattgtt atccgctcac aattccccta
421 tagtgagtcg tattaatttc gcgggatcga gatcgatctc gatcctctac gccggacgca
481 tcgtggccgg catcaccggc gccacaggtg cggttgctgg cgcctatatc gccgacatca
541 ccgatgggga agatcgggct cgccacttcg ggctcatgag cgcttgtttc ggcgtgggta
601 tggtggcagg ccccgtggcc gggggactgt tgggcgccat ctccttgcat gcaccattcc
661 ttgcggcggc ggtgctcaac ggcctcaacc tactactggg ctgcttccta atgcaggagt
721 cgcataaggg agagcgtcga gatcccggac accatcgaat ggcgcaaaac ctttcgcggt
781 atggcatgat agcgcccgga agagagtcaa ttcagggtgg tgaatgtgaa accagtaacg
841 ttatacgatg tcgcagagta tgccggtgtc tcttatcaga ccgtttcccg cgtggtgaac
901 caggccagcc acgtttctgc gaaaacgcgg gaaaaagtgg aagcggcgat ggcggagctg
961 aattacattc ccaaccgcgt ggcacaacaa ctggcgggca aacagtcgtt gctgattggc
1021 gttgccacct ccagtctggc cctgcacgcg ccgtcgcaaa ttgtcgcggc gattaaatct
1081 cgcgccgatc aactgggtgc cagcgtggtg gtgtcgatgg tagaacgaag cggcgtcgaa
1141 gcctgtaaag cggcggtgca caatcttctc gcgcaacgcg tcagtgggct gatcattaac
1201 tatccgctgg atgaccagga tgccattgct gtggaagctg cctgcactaa tgttccggcg
1261 ttatttcttg atgtctctga ccagacaccc atcaacagta ttattttctc ccatgaagac
1321 ggtacgcgac tgggcgtgga gcatctggtc gcattgggtc accagcaaat cgcgctgtta
1381 gcgggcccat taagttctgt ctcggcgcgt ctgcgtctgg ctggctggca taaatatctc
1441 actcgcaatc aaattcagcc gatagcggaa cgggaaggcg actggagtgc catgtccggt
1501 tttcaacaaa ccatgcaaat gctgaatgag ggcatcgttc ccactgcgat gctggttgcc
1561 aacgatcaga tggcgctggg cgcaatgcgc gccattaccg agtccgggct gcgcgttggt
1621 gcggacatct cggtagtggg atacgacgat accgaagaca gctcatgtta tatcccgccg
1681 ttaaccacca tcaaacagga ttttcgcctg ctggggcaaa ccagcgtgga ccgcttgctg
1741 caactctctc agggccaggc ggtgaagggc aatcagctgt tgcccgtctc actggtgaaa
1801 agaaaaacca ccctggcgcc caatacgcaa accgcctctc cccgcgcgtt ggccgattca
1861 ttaatgcagc tggcacgaca ggtttcccga ctggaaagcg ggcagtgagc gcaacgcaat
1921 taatgtaagt tagctcactc attaggcacc gggatctcga ccgatgccct tgagagcctt
1981 caacccagtc agctccttcc ggtgggcgcg gggcatgact atcgtcgccg cacttatgac
2041 tgtcttcttt atcatgcaac tcgtaggaca ggtgccggca gcgctctggg tcattttcgg
2101 cgaggaccgc tttcgctgga gcgcgacgat gatcggcctg tcgcttgcgg tattcggaat
2161 cttgcacgcc ctcgctcaag ccttcgtcac tggtcccgcc accaaacgtt tcggcgagaa
2221 gcaggccatt atcgccggca tggcggcccc acgggtgcgc atgatcgtgc tcctgtcgtt
2281 gaggacccgg ctaggctggc ggggttgcct tactggttag cagaatgaat caccgatacg
2341 cgagcgaacg tgaagcgact gctgctgcaa aacgtctgcg acctgagcaa caacatgaat
2401 ggtcttcggt ttccgtgttt cgtaaagtct ggaaacgcgg aagtcagcgc cctgcaccat
2461 tatgttccgg atctgcatcg caggatgctg ctggctaccc tgtggaacac ctacatctgt
2521 attaacgaag cgctggcatt gaccctgagt gatttttctc tggtcccgcc gcatccatac
2581 cgccagttgt ttaccctcac aacgttccag taaccgggca tgttcatcat cagtaacccg
2641 tatcgtgagc atcctctctc gtttcatcgg tatcattacc cccatgaaca gaaatccccc
2701 ttacacggag gcatcagtga ccaaacagga aaaaaccgcc cttaacatgg cccgctttat
2761 cagaagccag acattaacgc ttctggagaa actcaacgag ctggacgcgg atgaacaggc
2821 agacatctgt gaatcgcttc acgaccacgc tgatgagctt taccgcagct gcctcgcgcg
2881 tttcggtgat gacggtgaaa acctctgaca catgcagctc ccggagacgg tcacagcttg
2941 tctgtaagcg gatgccggga gcagacaagc ccgtcagggc gcgtcagcgg gtgttggcgg
3001 gtgtcggggc gcagccatga cccagtcacg tagcgatagc ggagtgtata ctggcttaac
3061 tatgcggcat cagagcagat tgtactgaga gtgcaccata tatgcggtgt gaaataccgc
3121 acagatgcgt aaggagaaaa taccgcatca ggcgctcttc cgcttcctcg ctcactgact
3181 cgctgcgctc ggtcgttcgg ctgcggcgag cggtatcagc tcactcaaag gcggtaatac
3241 ggttatccac agaatcaggg gataacgcag gaaagaacat gtgagcaaaa ggccagcaaa
3301 aggccaggaa ccgtaaaaag gccgcgttgc tggcgttttt ccataggctc cgcccccctg
3361 acgagcatca caaaaatcga cgctcaagtc agaggtggcg aaacccgaca ggactataaa
3421 gataccaggc gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc tcctgttccg accctgccgc
3481 ttaccggata cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt ggcgctttct catagctcac
3541 gctgtaggta tctcagttcg gtgtaggtcg ttcgctccaa gctgggctgt gtgcacgaac
3601 cccccgttca gcccgaccgc tgcgccttat ccggtaacta tcgtcttgag tccaacccgg
3661 taagacacga cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa caggattagc agagcgaggt
3721 atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt ggtggcctaa ctacggctac actagaagga
3781 cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt cggaaaaaga gttggtagct
3841 cttgatccgg caaacaaacc accgctggta gcggtggttt ttttgtttgc aagcagcaga
3901 ttacgcgcag aaaaaaagga tctcaagaag atcctttgat cttttctacg gggtctgacg
3961 ctcagtggaa cgaaaactca cgttaaggga ttttggtcat gaacaataaa actgtctgct
4021 tacataaaca gtaatacaag gggtgttatg agccatattc aacgggaaac gtcttgctct
4081 aggccgcgat taaattccaa catggatgct gatttatatg ggtataaatg ggctcgcgat
4141 aatgtcgggc aatcaggtgc gacaatctat cgattgtatg ggaagcccga tgcgccagag
4201 ttgtttctga aacatggcaa aggtagcgtt gccaatgatg ttacagatga gatggtcaga
4261 ctaaactggc tgacggaatt tatgcctctt ccgaccatca agcattttat ccgtactcct
4321 gatgatgcat ggttactcac cactgcgatc cccgggaaaa cagcattcca ggtattagaa
4381 gaatatcctg attcaggtga aaatattgtt gatgcgctgg cagtgttcct gcgccggttg
4441 cattcgattc ctgtttgtaa ttgtcctttt aacagcgatc gcgtatttcg tctcgctcag
4501 gcgcaatcac gaatgaataa cggtttggtt gatgcgagtg attttgatga cgagcgtaat
4561 ggctggcctg ttgaacaagt ctggaaagaa atgcataaac ttttgccatt ctcaccggat
4621 tcagtcgtca ctcatggtga tttctcactt gataacctta tttttgacga ggggaaatta
4681 ataggttgta ttgatgttgg acgagtcgga atcgcagacc gataccagga tcttgccatc
4741 ctatggaact gcctcggtga gttttctcct tcattacaga aacggctttt tcaaaaatat
4801 ggtattgata atcctgatat gaataaattg cagtttcatt tgatgctcga tgagtttttc
4861 taagaattaa ttcatgagcg gatacatatt tgaatgtatt tagaaaaata aacaaatagg
4921 ggttccgcgc acatttcccc gaaaagtgcc acctgaaatt gtaaacgtta atattttgtt
4981 aaaattcgcg ttaaattttt gttaaatcag ctcatttttt aaccaatagg ccgaaatcgg
5041 caaaatccct tataaatcaa aagaatagac cgagataggg ttgagtgttg ttccagtttg
5101 gaacaagagt ccactattaa agaacgtgga ctccaacgtc aaagggcgaa aaaccgtcta
5161 tcagggcgat ggcccactac gtgaaccatc accctaatca agttttttgg ggtcgaggtg
5221 ccgtaaagca ctaaatcgga accctaaagg gagcccccga tttagagctt gacggggaaa
5281 gccggcgaac gtggcgagaa aggaagggaa gaaagcgaaa ggagcgggcg ctagggcgct
5341 ggcaagtgta gcggtcacgc tgcgcgtaac caccacaccc gccgcgctta atgcgccgct
5401 acagggcgcg tcccattcgc ca
//
pET30a载体质粒图谱pdf版和相关资料下载
pET30a载体应用举例
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