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Dr Xu,Senior Scientist
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| pGAPZ A, pGAPZ-A, pGAPZA |
| 毕赤酵母蛋白表达载体 |
| 高拷贝 |
| GAP |
| 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 2884 bp |
| pGAP-F:5´-GTCCCTATTTCAATCAATTGAA-3´ |
| 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´ |
| C-Myc, C-His |
| Zeocin 博来霉素 |
| HIS4/ Zeocin |
插入基因是必需包含起始密码子ATG。 |
| V200-20 |
| 稳定 Stable |
| 组成型 Constitutive |
| 非病毒 |
pGAPZA载体质粒图谱和多克隆位点信息
pGAPZA载体简介
甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）的酶在许多生物细胞中包括毕赤酵母，稳定高水平表达。 最近，GAPDH蛋白编码基因启动子（GAP）被深入研究，并在毕赤酵母中能够高水表达重组蛋白，这取决于使用的碳源（Waterham等人，，1997）。GAP启动子（PGAP）的重组蛋白表达水平略高于AOX1启动子。
pGAPZ A，B，和C载体（2.9 KB）和pGAPZα，B，和C（3.1 KB）载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白。重组蛋白表达为为带有C-末端myc抗原表位和C端His标签的融合蛋白。此外，pGAPZα表达的融合蛋白在N-端带有酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的α-因子分泌信号肽。这两个系列的载体都提供三个不同读码框的载体，以方便克隆的带有C-端标签和/或N-末端分泌信号肽的载体中。
这些载体是基于显性选择标记，Zeocin（博莱霉素）的筛选标记可以同时使用于毕赤酵母和大肠杆菌。
pGAPZA载体序列
DEFINITION Pichia pastoris vector for constitutive intracellular expression of
a protein.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pGAPZ A
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT Linearize within the GAP promoter for integration.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2884
/organism="synthetic DNA construct"
/lab_host="Pichia pastoris"
/mol_type="other DNA"
promoter 7..483
/note="GAP promoter"
/note="promoter for Pichia pastoris
glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase"
/note="color: #ffffff; direction: RIGHT"
misc_feature 484..563
/note="MCS"
/note="multiple cloning site"
/note="color: #99ccff"
CDS 564..593
/codon_start=1
/product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag"
/note="Myc"
/note="color: #cc99b2"
/translation="EQKLISEEDL"
CDS 609..626
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/note="color: #cc99b2"
/translation="HHHHHH"
terminator 705..951
/gene="Pichia pastoris AOX1"
/note="AOX1 terminator"
/note="transcription terminator for AOX1"
/note="color: #ffffff"
promoter 966..1377
/gene="S. cerevisiae TEF1"
/note="TEF1 promoter"
/note="promoter for?EF-1-alpha"
/note="color: #ffffff; direction: RIGHT"
promoter 1384..1431
/note="EM7 promoter"
/note="synthetic bacterial promoter?"
/note="color: #ffffff; direction: RIGHT"
CDS 1450..1824
/codon_start=1
/gene="Sh?ble from?Streptoalloteichus hindustanus"
/product="antibiotic-binding protein"
/note="BleoR"
/note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and
Zeocin(TM)"
/note="color: #ccffcc"
/translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD
VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR
EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"
terminator 1890..2137
/gene="S. cerevisiae CYC1"
/note="CYC1 terminator"
/note="transcription terminator for CYC1"
/note="color: #ffffff"
rep_origin complement(2212..2800)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
/note="color: #ffff00"
ORIGIN
1 agatcttttt tgtagaaatg tcttggtgtc ctcgtccaat caggtagcca tctctgaaat
61 atctggctcc gttgcaactc cgaacgacct gctggcaacg taaaattctc cggggtaaaa
121 cttaaatgtg gagtaatgga accagaaacg tctcttccct tctctctcct tccaccgccc
181 gttaccgtcc ctaggaaatt ttactctgct ggagagcttc ttctacggcc cccttgcagc
241 aatgctcttc ccagcattac gttgcgggta aaacggaggt cgtgtacccg acctagcagc
301 ccagggatgg aaaagtcccg gccgtcgctg gcaataatag cgggcggacg catgtcatga
361 gattattgga aaccaccaga atcgaatata aaaggcgaac acctttccca attttggttt
421 ctcctgaccc aaagacttta aatttaattt atttgtccct atttcaatca attgaacaac
481 tatttcgaaa cgaggaattc acgtggccca gccggccgtc tcggatcggt acctcgagcc
541 gcggcggccg ccagcttggg cccgaacaaa aactcatctc agaagaggat ctgaatagcg
601 ccgtcgacca tcatcatcat catcattgag ttttagcctt agacatgact gttcctcagt
661 tcaagttggg cacttacgag aagaccggtc ttgctagatt ctaatcaaga ggatgtcaga
721 atgccatttg cctgagagat gcaggcttca tttttgatac ttttttattt gtaacctata
781 tagtatagga ttttttttgt cattttgttt cttctcgtac gagcttgctc ctgatcagcc
841 tatctcgcag ctgatgaata tcttgtggta ggggtttggg aaaatcattc gagtttgatg
901 tttttcttgg tatttcccac tcctcttcag agtacagaag attaagtgag accttcgttt
961 gtgcggatcc cccacacacc atagcttcaa aatgtttcta ctcctttttt actcttccag
1021 attttctcgg actccgcgca tcgccgtacc acttcaaaac acccaagcac agcatactaa
1081 attttccctc tttcttcctc tagggtgtcg ttaattaccc gtactaaagg tttggaaaag
1141 aaaaaagaga ccgcctcgtt tctttttctt cgtcgaaaaa ggcaataaaa atttttatca
1201 cgtttctttt tcttgaaatt ttttttttta gtttttttct ctttcagtga cctccattga
1261 tatttaagtt aataaacggt cttcaatttc tcaagtttca gtttcatttt tcttgttcta
1321 ttacaacttt ttttacttct tgttcattag aaagaaagca tagcaatcta atctaagggc
1381 ggtgttgaca attaatcatc ggcatagtat atcggcatag tataatacga caaggtgagg
1441 aactaaacca tggccaagtt gaccagtgcc gttccggtgc tcaccgcgcg cgacgtcgcc
1501 ggagcggtcg agttctggac cgaccggctc gggttctccc gggacttcgt ggaggacgac
1561 ttcgccggtg tggtccggga cgacgtgacc ctgttcatca gcgcggtcca ggaccaggtg
1621 gtgccggaca acaccctggc ctgggtgtgg gtgcgcggcc tggacgagct gtacgccgag
1681 tggtcggagg tcgtgtccac gaacttccgg gacgcctccg ggccggccat gaccgagatc
1741 ggcgagcagc cgtgggggcg ggagttcgcc ctgcgcgacc cggccggcaa ctgcgtgcac
1801 ttcgtggccg aggagcagga ctgacacgtc cgacggcggc ccacgggtcc caggcctcgg
1861 agatccgtcc cccttttcct ttgtcgatat catgtaatta gttatgtcac gcttacattc
1921 acgccctccc cccacatccg ctctaaccga aaaggaagga gttagacaac ctgaagtcta
1981 ggtccctatt tattttttta tagttatgtt agtattaaga acgttattta tatttcaaat
2041 ttttcttttt tttctgtaca gacgcgtgta cgcatgtaac attatactga aaaccttgct
2101 tgagaaggtt ttgggacgct cgaaggcttt aatttgcaag ctggagacca acatgtgagc
2161 aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag
2221 gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc
2281 gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt
2341 tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct
2401 ttctcaatgc tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg
2461 ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct
2521 tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat
2581 tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg
2641 ctacactaga aggacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa
2701 aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt
2761 ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc
2821 tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgcatga
2881 gatc
//
pGAPZA载体质粒图谱pdf版和相关资料下载
pGAPZA载体应用举例
pYIP5
pDR195
pPICZα A
pHIC-PI
pRS426gal
pYEPlac112
pYX212
pFLD/CAT
pPICZα B
pESC-Leu
pYES2/CT
pYES2-EGFP
pMET C
pPink-LC
pGAPZα C
pGAPZ B
pPIC9K
pPIC9
SUMO protease
pGADT7
pYES2
pPIC ZαD
Ycplac33
p416GFD
pYRP7
pRS41H
pRS316
pESC-His
pYES2-NTC
pMETαC
pMET B
pPink-HC
pGAPZα B
pGAPZ A
pAO815
pPIC9k-His
pPICZ A
BFD15
pPIC ZαGB
pYEPlac195
pADH2
pYCP211
pFA6a-FGP(S65T)-kanMX6
pESC-URA
pYES6/CT
pYES2-NTA
pMETαB
pMET A
pHIL-D2
pGAPZα A
pPICZα C
pPIC3.5K
pAUR123
pPICZ C
LA503
pPIC ZαFC
Ycp22lac-EGFP
pYIP211
pYES2-kan
pRS426
pESC-TRP
pYES3/CT
pYES2-NTB
pMETαA
pPinkα-HC
pHIL-S1
pGAPZ C
pPICZ B
pPIC3.5
pSH47
pSH63
pSH65
pGBKT7
pHis2
pHisSi-1
pDest22
pGBKT7-53
pMyr
pGADT7-T
p53blue
pSos MAFB
pSos
p53his
pCL1
pGBKT7-Lam
pACT2 AD
pGAG424
pDest32
pBridge
pYD1
pDisplay
AH109
PichiaPink Strain3
SMD1168H
X-33
INVSC1
PichiaPink Strain2
SMD1163
KM71
SMD1168
PichiaPink Strain1
KM71H
PichiaPink Strain4
EBY100
GS115
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