出品公司: | Promega |
---|---|
载体名称: | pRL-TK |
质粒类型: | 哺乳细胞表达;启动子增强子报告系统 |
高拷贝/低拷贝: | -- |
启动子: | HSV TK |
克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
载体大小: | 4045bp |
5' 测序引物及序列: | -- |
3' 测序引物及序列: | -- |
载体标签: | -- |
载体抗性: | 氨苄青霉素(Ampicillin) |
筛选标记: | -- |
备注: | pRL-TK是海肾荧光素酶报告载体,含有SV40增强子。 |
产品目录号: | E2241 |
稳定性: | 瞬表达 |
组成型: | 组成型 |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
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载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
pRL 家族是野生型海肾萤光素酶(Rluc) 报告基因对照载体。pRL 载体提供组成型表达的海肾萤光素酶,可与一个萤火虫萤 光素酶载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾萤光素酶的表达为实验的萤火虫萤光素酶报告基因正态化提供内对照值。pRL 载 体包含一个编码海肾萤光素酶(Rluc) 的cDNA, 这个cDNA 从珊瑚虫类腔肠动物海肾(Renilla reniformis) 中克隆而来。目前 有四个不同的启动子构造。其中HSV- 胸腺嘧啶核苷激酶启动子(pRL-TK) 相对较弱, 更适用于海肾萤光素酶报告基因载体 的中性组成型表达。早期SV40 增强子/ 启动子区域(pRL-SV40) 和CMV 极早期增强子/ 启动子区域(pRL-CMV)一般提供高 水平转录,因此可能不适于作为实验载体带有强调控元件的共报告基因。一般我们建议在将要应用的目标细胞中验证某一 个特定共报告基因的性能。除了经过修饰的Rluc 报告基因外,所有pRL载体均是从dam–/dcm– E. coli K 宿主菌株分离而 来,这样可以使用对dam 或 dcm 甲基化敏感的限制性内切酶进行消化。
载体序列
LOCUS pRL-TK 4045 bp DNA SYN DEFINITION pRL-TK ACCESSION KEYWORDS SOURCE ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors. FEATURES Location/Qualifiers source 1..4045 /organism="pRL-TK" /mol_type="other DNA" CDS 332..796 /label="ORF frame 2" promoter complement(532..680) /label="TATA_promoter" promoter 543..758 /label="TK_promoter" misc_feature 829..961 /label="chim_int" promoter 1006..1024 /label="T7_promoter" CDS 1034..1969 /label="ORF frame 2" terminator complement(1997..2116) /label="SV40_PA_terminator" misc_feature complement(2011..2030) /label="EBV_rev_primer" promoter 2289..2317 /label="AmpR_promoter" gene 2359..3219 /label="Ampicillin" /gene="Ampicillin" CDS 2359..3219 /label="ORF frame 1" rep_origin 3374..3993 /label="pBR322_origin" ORIGIN 1 AGATCTAAAT GAGTCTTCGG ACCTCGCGGG GGCCGCTTAA GCGGTGGTTA GGGTTTGTCT 61 GACGCGGGGG GAGGGGGAAG GAACGAAACA CTCTCATTCG GAGGCGGCTC GGGGTTTGGT 121 CTTGGTGGCC ACGGGCACGC AGAAGAGCGC CGCGATCCTC TTAAGCACCC CCCCGCCCTC 181 CGTGGAGGCG GGGGTTTGGT CGGCGGGTGG TAACTGGCGG GCCGCTGACT CGGGCGGGTC 241 GCGCGCCCCA GAGTGTGACC TTTTCGGTCT GCTCGCAGAC CCCCGGGCGG CGCCGCCGCG 301 GCGGCGACGG GCTCGCTGGG TCCTAGGCTC CATGGGGACC GTATACGTGG ACAGGCTCTG 361 GAGCATCCGC ACGACTGCGG TGATATTACC GGAGACCTTC TGCGGGACGA GCCGGGTCAC 421 GCGGCTGACG CGGAGCGTCC GTTGGGCGAC AAACACCAGG ACGGGGCACA GGTACACTAT 481 CTTGTCACCC GGAGGCGCGA GGGACTGCAG GAGCTTCAGG GAGTGGCGCA GCTGCTTCAT 541 CCCCGTGGCC CGTTGCTCGC GTTTGCTGGC GGTGTCCCCG GAAGAAATAT ATTTGCATGT 601 CTTTAGTTCT ATGATGACAC AAACCCCGCC CAGCGTCTTG TCATTGGCGA ATTCGAACAC 661 GCAGATGCAG TCGGGGCGGC GCGGTCCCAG GTCCACTTCG CATATTAAGG TGACGCGTGT 721 GGCCTCGAAC ACCGAGCGAC CCTGCAGCGA CCCGCTTAAA AGCTTGATTC TTCTGACACA 781 ACAGTCTCGA ACTTAAGCTG CAGAAGTTGG TCGTGAGGCA CTGGGCAGGT AAGTATCAAG 841 GTTACAAGAC AGGTTTAAGG AGACCAATAG AAACTGGGCT TGTCGAGACA GAGAAGACTC 901 TTGCGTTTCT GATAGGCACC TATTGGTCTT ACTGACATCC ACTTTGCCTT TCTCTCCACA 961 GGTGTCCACT CCCAGTTCAA TTACAGCTCT TAAGGCTAGA GTACTTAATA CGACTCACTA 1021 TAGGCTAGCC ACCATGACTT CGAAAGTTTA TGATCCAGAA CAAAGGAAAC GGATGATAAC 1081 TGGTCCGCAG TGGTGGGCCA GATGTAAACA AATGAATGTT CTTGATTCAT TTATTAATTA 1141 TTATGATTCA GAAAAACATG 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ACCGGATAAG GCGCAGCGGT CGGGCTGAAC GGGGGGTTCG 3721 TGCACACAGC CCAGCTTGGA GCGAACGACC TACACCGAAC TGAGATACCT ACAGCGTGAG 3781 CTATGAGAAA GCGCCACGCT TCCCGAAGGG AGAAAGGCGG ACAGGTATCC GGTAAGCGGC 3841 AGGGTCGGAA CAGGAGAGCG CACGAGGGAG CTTCCAGGGG GAAACGCCTG GTATCTTTAT 3901 AGTCCTGTCG GGTTTCGCCA CCTCTGACTT GAGCGTCGAT TTTTGTGATG CTCGTCAGGG 3961 GGGCGGAGCC TATGGAAAAA CGCCAGCAAC GCGGCCTTTT TACGGTTCCT GGCCTTTTGC 4021 TGGCCTTTTG CTCACATGGC TCGAC
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