ATCC CCL-119(CCRF-CEM) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CCL-119(CCRF-CEM)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CCL-119(CCRF-CEM), CCRF-CEM, 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 存储人: GE Foley 种属来源: 人 组织来源: 外周血；T淋巴细胞 疾病特征: 白血病, 急性淋巴细胞白血病 细胞形态: 淋巴母细胞 生长特性: 悬浮生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CCL-119 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10,11 D13S317: 11,12 D16S539: 10,13 D5S818: 12,13 D7S820: 9,13 THO1: 6,7 TPOX: 8 vWA: 17,19 同工酶: ADA, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1 PEP-D, 1 PGD, C PGM1, 1 PGM3, 0 备注: Nucleotide (GenBank) : Z23090 H.sapiens mRNA for 28 kDa heat shock protein. Nucleotide (GenBank) : AF146431 Homo sapiens cell-line CCRF-CEM sodium/hydrogen exchanger isoform 1 mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : Z12846 HSA08C081 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 08C08, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : Z13104 HSA25H071 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 25H07, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : Z13398 HSA45A081 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 45A08, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : Z13431 HSA48B021 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 48B02, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : Z13562 HSA57F051 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 57F05, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : Z13677 HSA65D041 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 65D04, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : Z13711 HSA68F071 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 68F07, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : Z13717 HSA69C041 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 69C04, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : Z15500 HSA23D012 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 23D01, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : Z15555 HSA27A032 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 27A03, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : Z16011 HSA56G072 CLONTECH cDNA library CCRF-CEM, cat# HL1063g Homo sapiens cDNA clone 56G07, mRNA sequence. 参考文献: Foley GE, et al. Continous culture of human lymphoblasts from peripheral blood of a child with acute leukemia. Cancer 18: 522-529, 1965. PubMed: 14278051 Sandstrom PA, Buttke TM. Autocrine production of extracellular catalase prevents apoptosis of the human CEM T-cell line in serum-free medium. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 4708-4712, 1993. PubMed: 8506323 Adams RA. Formal discussion: the role of transplantation in the experimental investigation of human leukemia and lymphoma. Cancer Res. 27: 2479-2482, 1967. PubMed: 4170381 Uzman BG, et al. Morphologic variations in human leukemic lymphoblasts (CCRF-CEM cells) after long-term culture and exposure to chemotherapeutic agents. A study with the electron microscope. Cancer 19: 1725-1742, 1966. PubMed: 5224274 Adams RA, et al. Leukemia: serial transplantation of human leukemic lymphoblasts in the newborn Syrian hamster. Cancer Res. 27: 772-783, 1967. PubMed: 4295047 NTCC CCL-119(CCRF-CEM)人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞特点和简介 G.E. Foley 等人建立了类淋巴母细胞细胞株CCRF-CEM。 细胞是1964年11月从一位四岁白人女性急性淋巴细胞白血病患者的外周血白血球衣中得到。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC CCL-119(CCRF-CEM)人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CCL-119(CCRF-CEM)人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-119(CCRF-CEM)人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。