BioVector® E. coli MKH13 电转化专用感受态菌株 / BioVector® E. coli MKH13 Electroporation-Grade Strain

通用定义 / General Definition:

BioVector® MKH13 是一种经过特殊遗传改造的大肠杆菌 (E. coli) 衍生菌株，专门用于高效率的电转化 (Electroporation)。该菌株最初源自 MC1061 菌株（$hsdR^-$, $mcrB^-$），并针对大型质粒的摄取和复杂文库的构建进行了优化。MKH13 具有极高的转化效率和优良的生长特性，特别是在需要处理高盐分 DNA 样本或构建超大规模 cDNA/基因组文库时，它是科研实验室的常用选择。

BioVector® MKH13 is a genetically engineered E. coli strain specifically optimized for high-efficiency electroporation. Originally derived from the MC1061 background ($hsdR^-$, $mcrB^-$), this strain has been further refined for the uptake of large plasmids and the construction of complex genetic libraries. MKH13 is characterized by its superior transformation efficiency and robust growth kinetics. It is an ideal host for demanding applications such as the construction of ultra-large cDNA or genomic libraries and the transformation of DNA samples with non-ideal purity.

BioVector® MKH13 技术规格 (Technical Specifications)

1. 基因型 (Genotype)

F- araD139 Δ(ara-leu)7696 galE15 galK16 Δ(lac)X74 rpsL (StrR) hsdR2 (rK- mK+) mcrA mcrB1

• hsdR2: 缺失限制性内切酶系统，防止异源 DNA 被降解，提高转化率。

• mcrA / mcrB1: 缺失甲基化限制系统，允许转化含有甲基化胞嘧啶的 DNA（如来自哺乳动物基因组的 DNA）。

• rpsL (StrR): 具有链霉素抗性。

• Δ(lac)X74: 允许进行蓝白斑筛选（需配合含有 lacZ 补体的载体）。

2. 主要特性 (Key Features)

• 高转化效率: 电转化效率通常可达 $1 \times 10^{10} \text{ cfu/μg}$ 质粒 DNA。

• 大型载体兼容性: 能够稳定容纳和扩增大于 10 kb 的大型质粒或 BAC 载体。

• 背景干净: 极低的自发突变率，确保克隆的一致性。

实验应用指南 (Experimental Guidelines)

1. 应用领域 (Applications)

• 文库构建: 构建高覆盖度的 TALE 或 CRISPR 文库、cDNA 文库及全基因组文库。

• 难转化质粒: 用于转化超螺旋程度低或线性化的 DNA 片段。

• 常规克隆: 替代传统的化学转化菌株（如 DH5α），提供更快的转化流程。

2. 转化步骤简述 (Transformation Protocol)

1. 预冷: 将电极皿和 MKH13 感受态细胞置于冰上预冷。

2. 混合: 取 50 μL 感受态细胞，加入 1-2 μL DNA（确保脱盐），轻弹混匀。

3. 电击: 转移至电击皿，根据电转仪设定参数（通常为 1.8-2.5 kV）进行脉冲。

4. 复苏: 立即加入 1 mL SOC 或 LB 培养基，37°C 振荡复苏 1 小时。

5. 涂布: 涂布于含相应抗生素的平板，37°C 过夜培养。

技术指标 (Technical Data)

注意 / Note: MKH13 具有内源性的链霉素抗性，因此在选择筛选标记时请避免使用链霉素。为获得最高转化效率，建议使用微量透析法对 DNA 样本进行脱盐处理。

MKH13 carries endogenous streptomycin resistance; therefore, avoid using streptomycin as a selection marker for your vectors. For maximum efficiency, ensure your DNA samples are de-salted using microdialysis prior to electroporation.

BioVector NTCC质粒载体菌株细胞蛋白抗体基因保藏中心

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