BioVector® pLIB biGbac 系统载体 / BioVector® pLIB biGbac System Vector

通用定义 / General Definition:BioVector® pLIB 在 biGbac 系统中扮演着核心角色。biGbac 是一种基于 Gibson Assembly（吉布森组装） 的高效多基因表达平台，专门用于在昆虫细胞（如 Sf9, High Five）中通过杆状病毒表达系统表达复杂的大型多亚基蛋白质复合物。在 biGbac 工作流程中，pLIB 载体作为一级克隆载体（Level 1），用于接收和储存单个基因。随后，多个 pLIB 载体中的基因片段可以被组装进二级载体（Level 2，如 pBIG1 或 pBIG2），最终实现多个基因的同时高水平表达。

In the biGbac system, BioVector® pLIB serves as the fundamental Level 1 cloning vector. The biGbac system is a high-efficiency multi-gene expression platform based on Gibson Assembly, specifically designed for expressing large, multi-subunit protein complexes in insect cells (e.g., Sf9, High Five) using the Baculovirus Expression Vector System (BEVS). Within the biGbac workflow, pLIB vectors hold individual genes. These gene cassettes are then assembled into Level 2 vectors (such as pBIG1 or pBIG2) to achieve the simultaneous, high-level expression of multiple genes from a single baculoviral genome.

BioVector® pLIB biGbac 技术说明书 (Plasmid Datasheet)

中文版说明书

1. 产品基本信息

• 产品名称： BioVector® pLIB (biGbac Level 1) 载体

• 系统用途： 多基因复合体表达 (biGbac 系统)

• 启动子： Polh (多角体蛋白启动子)

• 抗性基因： 氨苄青霉素 (Ampicillin)

• 克隆位点： 专门设计的用于 Gibson 组装的侧翼序列

2. 培养与扩增条件

• 宿主菌： BioVector® DH5-alpha。

• 培养基： BioVector® LB 培养基。

• 抗生素： BioVector® 氨苄青霉素 (100 ug/mL)。

• 环境： 37 摄氏度，恒温振荡。

3. 载体应用

• 多亚基蛋白组装： 用于构建包含 5 个、10 个甚至更多亚基的蛋白质复合物。

• 代谢通路重建： 在昆虫细胞中重组复杂的代谢路径。

• 结构生物学： 为冷冻电镜 (Cryo-EM) 或 X 射线晶体学提供高质量的复合体蛋白。

4. 注意事项

• 侧翼序列： 每个 pLIB 版本（如 pLIB-1, pLIB-2 等）具有特定的接头序列，必须按照 biGbac 组装逻辑选择正确的载体顺序。

• 序列验证： 在进行二级组装前，必须通过 BioVector® 测序服务确保 pLIB 内部的目的基因序列完全准确。

English Datasheet

1. General Product Information

• Product Name: BioVector® pLIB (biGbac Level 1) Vector

• System Purpose: Multi-protein complex expression (biGbac platform)

• Promoter: Polh (Polyhedrin promoter)

• Antibiotic Resistance: Ampicillin

• Cloning Design: Flanked by specific sequences optimized for Gibson Assembly

2. Culture and Amplification Conditions

• Host Strains: BioVector® DH5-alpha.

• Culture Medium: BioVector® LB Medium.

• Antibiotic Supplement: BioVector® Ampicillin (100 ug/mL).

• Incubation: 37 degrees Celsius with constant shaking.

3. Applications

• Multi-subunit Assembly: Constructing protein complexes containing 5, 10, or more individual subunits.

• Metabolic Engineering: Reconstituting complex metabolic pathways within insect cell hosts.

• Structural Biology: Producing high-quality protein complexes for Cryo-EM or X-ray crystallography.

4. Key Usage Notes

• Flanking Sequences: Each pLIB variant (e.g., pLIB-1, pLIB-2) contains unique linker sequences. It is critical to select the correct pLIB position according to the biGbac assembly logic.

• Sequence Integrity: Before proceeding to Level 2 assembly, ensure the gene insert within pLIB is verified using BioVector® sequencing services to confirm 100% accuracy.

Note: For optimal Gibson Assembly efficiency, use the BioVector® biGbac Assembly Master Mix. When purifying pLIB plasmids for large-scale assembly, ensure high DNA concentration and purity using BioVector® Plasmid Midi Kits.

Supplier生产厂家: BioVector NTCC典型培养物保藏中心

E-mail: BioVector@163.com

http://www.biovector.net