K12 Azir E.coli大肠杆菌菌株及感受态细胞-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

l■ 产品概述：

Escherichia coli J53 (F− met pro Azi^r)is a derivative of E. coli K-12 which is resistant to sodium azide. This strainhas been widely used as a general recipient strain for various conjugationexperiments.

E.coli Chemically CompetentCells K12 Azi^r

产品套装编号：Biovector-16892A

储存条件：-80℃保存保存时间：3 Months

产品内容

Competent Cells K12Azi^r

包装规格

10×100μL

■ 产品储存：

-80°C保存，避免反复冻融。

■ 使用步骤：

1.把感受态细胞置于冰中融化。

2.把100uL的感受态细胞移至灭菌处理的试管内。

3.加入用于转化的DNA（10 ng以下）。

4.冰中放置30分钟。

5.42℃放置90秒。

6.冰中放置5分钟。

7.加入37℃预温好的SOC培养基，使终体积为1 ml。

8.37℃振荡培养1小时（160～225 rpm）。

9.6000rpm 离心，弃上清，保留100uL左右菌液重悬混匀后吸取并涂布琼脂平板培养基。

10.37℃过夜培养。

■ 注意事项：

1. 请用低温运输。

2. 不立即使用的感受态细胞请在-80℃下保存（融化后的感受态细胞不能再冻结保存）。

3. 转化时请使用传热性能较好的试管。一般的 1.5 ml 微型离心管也可使用，但转化效率会有所下降（此时请在使用方法5.的42℃下放置60秒）。

4. 对100 uL的感受态细胞，用于转化的质粒DNA量请控制在10 ng以下，并保证DNA 溶液的体积在20 uL以下。否则会影响转化效率。

5. 使用SOC培养基的地方也可使用 LB 培养基，但此时转化效率会有所下降。