铜绿假单胞菌基因敲除编辑质粒载体-BioVector NTCC质粒载体菌株细胞蛋白抗体基因保藏中心

基于Red同源重组和CRISPR/Cas9的铜绿假单胞菌基因组编辑服务

基于Red同源重组法的铜绿假单胞菌基因组改造

铜绿假单胞菌基因敲除的传统方法是利用自身的Red系统对外源进入的DNA进行同源重组，从而实现目标基因的等位替换。通过设计靶基因的同源融合片段，将其克隆至自杀载体中，自杀载体通过接合输入到靶细菌。通过抗生素筛选细菌基因组靶位点整合有自杀载体的插入突变株。在第二轮反向选择压力下，只有铜绿假单胞菌基因组发生第二次同源重组并丢失自杀质粒才可以存活。

基于CRISPR/Cas9平台的铜绿假单胞菌基因组改造

CRISPR/Cas9系统是细菌和古细菌特有的一种天然防御系统,用于抵抗病毒或外源性质粒的侵害。BioVector NTCC Inc.推出CRISPR方法进行铜绿假单胞菌基因组改造服务（包括基因敲除、定点突变、定点插入外源序列等）。相比于传统的基因敲除方法，该方法速度快，无痕；非常便于后续的实验研究。

研究内容

• 铜绿假单胞菌基因敲除（Pseudomonas aeruginosa gene knockout）

• 铜绿假单胞菌基因敲入（Pseudomonas aeruginosa gene knockin）

• 铜绿假单胞菌基因点突变（Pseudomonas aeruginosa gene point mutation）

服务优势

• 无痕编辑

• 多基因编辑：能同时敲除多达3个基因

• 便于筛选：不要求靶细菌具有抗生素抗性

• 周期快：3周交付

• 定制服务：模式菌株或者宿主菌株

• 定制服务：开发特殊物种的基因组编辑系统

客户提供信息

• 铜绿假单胞菌宿主菌株信息

• 靶基因的ID或靶序列

下游应用

• 抗生素及重要工业用酶

• 发现新的基因功能

• 优化代谢通路，提升代谢产物产量，实现工业化生产

参考文献：

• Selle K, Barrangou R. Harnessing CRISPR–Cas systems for bacterial genome editing[J]. Trends in microbiology, 2015, 23(4): 225-232.

• Zerbini, F., Zanella, I., Fraccascia, D., König, E., Irene, C., & Frattini, L. F., et al. (2017). Large scale validation of an efficient CRISPR/Cas-based multi gene editing protocol in Escherichia coli. Microbial Cell Factories, 16(1), 68.