ATCC CCL-229(LoVo) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CCL-229(LoVo)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CCL-229(LoVo), LoVo, 人结肠癌细胞 存储人: M Romsdahl 种属来源: 人 组织来源: 结肠 疾病特征: 直结肠腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: F12K培养基(SIGMA,货号N3520)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CCL-229 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: XY CSF1PO: 11,13,14 D13S317: 8, 11 D16S539: 9, 12 D5S818: 11, 12, 13 D7S820: 9.3,10, 11 THO1: 9.3 TPOX: 8,9 vWA: 17,18 同工酶: ES-D, 1 G6PD, B PGD, A PGM1, 2 PGM3, 1-2 备注: Nucleotide (GenBank) : X17097 Human PSG9 mRNA for pregnancy specific glycoprotein 9. Nucleotide (GenBank) : X17098 Human PSG10 mRNA for pregnancy specific glycoprotein 10. Nucleotide (GenBank) : X14831 Human mRNA for transmembrane carcinoembryonic antigen BGPb (formerly TM2-CEA). 参考文献: Drewinko B, et al. Further biologic characteristics of a human carcinoembryonic antigen-producing colon carcinoma cell line. J. Natl. Cancer Inst. 61: 75-83, 1978. PubMed: 276641 Drewinko B, Yand LY. Restriction of CEA synthesis to the stationary phase of growth of cultured human colon carcinoma cells. Exp. Cell Res. 101: 414-416, 1976. PubMed: 964319 Drewinko B, et al. Establishment of a human carcinoembryonic antigen-producing colon adenocarcinoma cell line. Cancer Res. 36: 467-475, 1976. PubMed: 1260746 Trainer DL, et al. Biological characterization and oncogene expression in human colorectal carcinoma cell lines. Int. J. Cancer 41: 287-296, 1988. PubMed: 3338874 Keesee SK, et al. Nuclear matrix proteins in human colon cancer. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91: 1913-1916, 1994. PubMed: 8127905 NTCC CCL-229(LoVo)人结肠癌细胞特点和简介 LoVo建自1971年，从诊断为结肠腺癌的56岁男性白人的一个转移到左锁骨上区的肿瘤结节建系。 癌基因Ｃ-myc, K-ras, H-ras, N-ras, Myb, sis 和fos的表达呈阳性。 癌基因N-myc的表达未做检测。 它在裸鼠中能成瘤。 与107细胞联合皮下接种５只裸鼠21天后全部成瘤。 表达肿瘤特异的核基质蛋白蛋白CC-3和CC-4。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC CCL-229(LoVo)人结肠癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联 系。 NTCC CCL-229(LoVo)人结肠癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基 混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜） 。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作 台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后， 加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清 和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液 ，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记 录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-229(LoVo)人结肠癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生 请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞 因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担 。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞 仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再 次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免 费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时 可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC HTB-48(SK-NEP-1) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC HTB-48(SK-NEP-1)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-48(SK-NEP-1), SK-NEP-1, 人肾母细胞瘤细胞 存储人: G Trempe, LJ Old 种属来源: 人 组织来源: 肾 疾病特征: 肋膜渗出液 细胞形态: 圆形 生长特性: 半贴壁生长 培养基: McCOY's 5A(SIGMA,货号M4892)，85%；FBS，15%。 产品目录号: HTB-48 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10 D13S317: 11 D16S539: 11 D5S818: 13 D7S820: 8,10 THO1: 8,9.3 TPOX: 8,11 vWA: 15,19 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 2 PGM1, 1-2 PGM3, 1 参考文献: Fogh J. Human tumor cells in vitro. New York: Plenum Press; 1975. Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034 Fogh J. Cultivation, characterization, and identification of human tumor cells with emphasis on kidney, testis, and bladder tumors. Natl. Cancer Inst. Monogr. 49: 5-9, 1978. PubMed: 571047 Orkin SH, et al. Development of homozygosity for chromosome 11p markers in Wilms' tumour. Nature 309: 172-174, 1984. PubMed: 6325937 NTCC HTB-48(SK-NEP-1)人肾母细胞瘤细胞特点和简介 超微结构有少许微绒毛，连接复合物，形态完整的高尔基体，内质网多为光滑型，脂滴，没有病毒棵粒。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC HTB-48(SK-NEP-1)人肾母细胞瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联 系。 NTCC HTB-48(SK-NEP-1)人肾母细胞瘤细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基 混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜） 。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作 台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后， 加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清 和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液 ，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记 录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-48(SK-NEP-1)人肾母细胞瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生 请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞 因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担 。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞 仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再 次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免 费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时 可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC HTB-15(U-118 MG) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC HTB-15(U-118 MG)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC HTB-15(U-118 MG), U-118 MG, 人脑星形胶质母细胞瘤 存储人: J Ponten 种属来源: 人 组织来源: 大脑 疾病特征: 星形胶质母细胞瘤 细胞形态: 混合型 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基(GIBCO,货号12800017)，90%；FBS，10%。 产品目录号: HTB-15 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 9 D16S539: 12,13 D5S818: 11 D7S820: 9 THO1: 6 TPOX: 8 vWA: 18 同工酶: AK-1, 1-2 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1-2 Me-2, 1 PGM1, 2 PGM3, 2 参考文献: Beckman G, et al. G-6-PD and PGM phenotypes of 16 continuous human tumor cell lines. Evidence against cross-contamination and contamination by HeLa cells. Hum. Hered. 21: 238-241, 1971. PubMed: 4332744 Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034 Olopade OI, et al. Molecular analysis of deletions of the short arm of chromosome 9 in human gliomas. Cancer Res. 52: 2523-2529, 1992. PubMed: 1568221 Ponten J, Macintyre EH. Long term culture of normal and neoplastic human glia. Acta Pathol. Microbiol. Scand. 74: 465-486, 1968. PubMed: 4313504 NTCC HTB-15(U-118 MG)人脑星形胶质母细胞瘤特点和简介 据报道来自不同个体的胶质母细胞瘤细胞株U-118 MG (HTB-15) 和 U-138 MG (HTB-16)有着一致的VNTR和相近的STR模式。 U-118 MG 和 U-138 MG细胞遗传学上很相似并有至少六个衍生标记染色体。 这是1966年至1969年间J. Ponten和同事从恶性神经胶质瘤中构建的细胞株中的一株(其它包括NTCC HTB-14和 NTCC HTB-16 and NTCC HTB-17)。 1987年用BM-Cycline培养6周去除了支原体污染。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NTCC HTB-15(U-118 MG)人脑星形胶质母细胞瘤接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-15(U-118 MG)人脑星形胶质母细胞瘤培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-15(U-118 MG)人脑星形胶质母细胞瘤培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CRL-6475(B16-F10) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-6475(B16-F10)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-6475(B16-F10), B16-F10, 小鼠皮肤黑色素瘤细胞 种属来源: 小鼠 组织来源: 皮肤 疾病特征: 黑色素瘤 细胞形态: 上皮细胞样混有梭形细胞 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基(GIBCO,货号12800017)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-6475 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 参考文献: Fidler IJ. Biological behavior of malignant melanoma cells correlated to their survival in vivo. Cancer Res. 35: 218-224, 1975. PubMed: 1109790 Fidler IJ, et al. Tumoricidal properties of mouse macrophages activated with mediators from rat lymphocytes stimulated with concanavalin A. Cancer Res. 36: 3608-3615, 1976. PubMed: 953987 Fidler IJ, Bucana C. Mechanism of tumor cell resistance to lysis by syngeneic lymphocytes. Cancer Res. 37: 3945-3956, 1977. PubMed: 908034 Fidler IJ, Kripke ML. Metastasis results from preexisting variant cells within a malignant tumor. Science 197: 893-895, 1977. PubMed: 887927 Briles EB, Kornfeld S. Isolation and metastatic properties of detachment variants of B16 melanoma cells. J. Natl. Cancer Inst. 60: 1217-1222, 1978. PubMed: 418183 NTCC CRL-6475(B16-F10)小鼠皮肤黑色素瘤细胞特点和简介 B16-F10是B16-F0的亚系。 NTCC CRL-6475(B16-F10)小鼠皮肤黑色素瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-6475(B16-F10)小鼠皮肤黑色素瘤细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-6475(B16-F10)小鼠皮肤黑色素瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CRL-2099(KU812) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-2099(KU812)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-2099(KU812), KU812, 人外周血嗜碱性白血病细胞 存储人: K Kishi 种属来源: 人 组织来源: 外周血 疾病特征: 慢性髓性白血病 细胞形态: 骨髓母细胞 生长特性: 悬浮生长 培养基: IMDM培养基(GIBCO,货号12200036)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-2099 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Kishi K. A new leukemia cell line with Philadelphia chromosome characterized as basophil precursors. Leuk. Res. 9: 381-390, 1985. PubMed: 3858609 Okano H, et al. Hemoglobin synthesis of both adult and fetal types in a human CML cell line. J. Biochem. 104: 162-164, 1988. PubMed: 2460439 Okamura S, et al. Expression of cytokine genes in hematological malignancies. Nippon Ketsueki Gakkai Zasshi 52: 1423-1432, 1989. PubMed: 2698048 The KU812 cell line was established from the peripheral blood of a patient in blast crisis of chronic myelogenous leukemia. The cells contain at least one Ph1 (Philadelphia) chromosome. The cell line has some characteristics of basophilic leukocytes (Fc receptors, basophilic granules, histamine production), and are negative for lymphoid markers. Blom T, et al. Phenotypic characterization of KU812, a cell line identified as an immature human basophilic leukocyte. Eur. J. Immunol. 22: 2025-2032, 1992. PubMed: 1639103 人外周血嗜碱性白血病细胞特点和简介 从一位慢性髓性白血病患者暴发期的外周血建立了KU812细胞株。 这些细胞至少有一个Ph1(费城)染色体。 这株细胞有一些嗜碱性细胞的标记(如Fc 受体，碱性颗粒，生成组胺)，而淋巴标记阴性。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 人外周血嗜碱性白血病细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联 系。 人外周血嗜碱性白血病细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然 后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养 过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶 中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落 ，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中 或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞， 根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻 存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时 以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 人外周血嗜碱性白血病细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述 现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、 所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户 自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细 胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴 壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜 培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为 您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培 养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细 胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CCL-89(AtT-20) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CCL-89(AtT-20)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CCL-89(AtT-20), AtT-20 小鼠垂体瘤细胞 存储人: G Sato 种属来源: 小鼠 组织来源: 垂体 疾病特征: 垂体瘤 细胞形态: 小的圆形细胞 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CCL-89 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 参考文献: Buonassisi V, et al. Hormone-producing cultures of adrenal and pituitary tumor origin. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 48: 1184-1190, 1962. PubMed: 13874682 Furth J, et al. ACTH secreting transplantable pituitary tumors. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 84: 253-254, 1953. PubMed: 13121002 Tabernero C, et al. Identification of an RNA sequence within an intracisternal-A particle element able to replace Rev-mediated posttranscriptional regulation of human immunodeficiency virus type 1. J. Virol. 71: 95-101, 1997. PubMed: 8985327 Gamby C, et al. Growth-associated protein-43 (GAP-43) facilitates peptide hormone secretion in mouse anterior pituitary AtT-20 cells. J. Biol. Chem. 271: 10023-10028, 1996. PubMed: 8626556 小鼠垂体瘤细胞特点和简介 AtT20生长时不贴壁，而结成活细胞团。能抗脊髓灰质炎病毒。 检测发现肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。 在本库通过支原体检测。 小鼠垂体瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联 系。 小鼠垂体瘤细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然 后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养 过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶 中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落 ，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中 或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞， 根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻 存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时 以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 小鼠垂体瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述 现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、 所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户 自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细 胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴 壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜 培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为 您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培 养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细 胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CRL-1739(AGS) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-1739(AGS)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-1739(AGS), AGS, 人胃腺癌细胞 存储人: SC Barranco 种属来源: 人 组织来源: 胃 疾病特征: 胃癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: F12K培养基(SIGMA,货号N3520)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-1739 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: D5S818: 9, 12 D13S317: 12 D7S820: 10, 11 D16S539: 11, 13 vWA: 16, 17 TH01: 6, 7 Amelogenin: X TPOX: 11, 12 CSF1PO: 11, 12 参考文献: Barranco SC, et al. Heterogeneous responses of an in vitro model of human stomach cancer to anticancer drugs. Invest. New Drugs 1: 117-127, 1983. PubMed: 6678861 Barranco SC, et al. Establishment and characterization of an in vitro model system for human adenocarcinoma of the stomach. Cancer Res. 43: 1703-1709, 1983. PubMed: 6831414 Rieder G, et al. Role of adherence in Interleukin-8 induction in Helicobacter pylori-associated gastritis. Infect. Immun. 65: 3622-3630, 1997. PubMed: 9284128 Segal ED, et al. Helicobacter pylori attachment to gastric cells induces cytoskeletal rearrangements and tyrosine phosphorylation of host cell proteins. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 1259-1264, 1996. PubMed: 8577751 AGS人胃腺癌细胞特点和简介 The AGS细胞株源自一个未经治疗的切除肿瘤碎块。 在下述培养基中植板率为34%。 支原体感染后消除。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 AGS人胃腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 AGS人胃腺癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 AGS人胃腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CRL-1848(NCI-H292) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-1848(NCI-H292)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-1848(NCI-H292), NCI-H292, 人肺癌细胞（淋巴结转移 存储人: AF Gazdar 种属来源: 人 组织来源: 肺 疾病特征: 肺粘膜上皮细胞癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-1848 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 已被选定为原型的碎片进入人体细胞转染人类基因组研究HBV及其个体基因的作用在病毒性肝炎和肝癌的发病机制。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10 D13S317: 11,12 D16S539: 9,13 D5S818: 13 D7S820: 10 THO1: 8 TPOX: 8,11 vWA: 16,17 参考文献: Banks-Schlegel SP, et al. Intermediate filament and cross-linked envelope expression in human lung tumor cell lines. Cancer Res. 45: 1187-1197, 1985. PubMed: 2578876 Yoakum GH, et al. High-frequency transfection and cytopathology of the hepatitis B virus core antigen gene in human cells. Science 222: 385-389, 1983. PubMed: 6194563 Carney DN, et al. Establishment and identification of small cell lung cancer cell lines having classic and variant features. Cancer Res. 45: 2913-2923, 1985. PubMed: 2985257 NCI-H292人肺癌细胞（淋巴结转移）特点和简介 此细胞株源自肺粘膜上皮细胞癌的淋巴结转移灶。 这个细胞系用化学合成培养基分离得到，并转换成含血清培养液培养。 此细胞在培养时在亚显微结构上保留了粘膜上皮细胞的特性，并表现出鳞状分化的多种标记。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 NCI-H292人肺癌细胞（淋巴结转移）接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 NCI-H292人肺癌细胞（淋巴结转移）培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NCI-H292人肺癌细胞（淋巴结转移）培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CRL-1550(Ca Ski) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-1550(Ca Ski)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-1550(Ca Ski), Ca Ski, 人宫颈癌肠转移细胞 存储人: RA Pattillo 种属来源: 人 组织来源: 子宫 疾病特征: 宫颈癌肠转移 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: RPMI-1640(GIBCO,货号31800022)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-1550 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10 D13S317: 8,12 D16S539: 11,12 D5S818: 13 D7S820: 8,11 THO1: 7 TPOX: 8 vWA: 17 同工酶: G6PD, B 备注: Nucleotide (GenBank) : U89348 Human papillomavirus type 16 variant, complete sequence. 参考文献: Pattillo RA, et al. Tumor antigen and human chorionic gonadotropin in CaSki cells: a new epidermoid cervical cancer cell line. Science 196: 1456-1458, 1977. PubMed: 867042 Baker CC, et al. Structural and transcriptional analysis of human papillomavirus type 16 sequences in cervical carcinoma cell lines. J. Virol. 61: 962-971, 1987. PubMed: 3029430 Pater MM, Pater A. Human papillomavirus types 16 and 18 sequences in carcinoma cell lines of the cervix. Virology 145: 313-318, 1985. PubMed: 2992153 Yee C, et al. Presence and expression of human papillomavirus sequences in human cervical carcinoma cell lines. Am. J. Pathol. 119: 361-366, 1985. PubMed: 2990217 Hendricks DT, et al. FHIT gene expression in human ovarian, endometrial, and cervical cancer cell lines. Cancer Res. 57: 2112-2115, 1997. PubMed: 9187105 Ca Ski人宫颈癌肠转移细胞特点和简介 这株细胞是从小肠肠系膜转移灶的细胞中建立的。 据报道，它含有完整的HPV-16(每个细胞大约600个拷贝)和HPV-18相关序列。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 Ca Ski人宫颈癌肠转移细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 Ca Ski人宫颈癌肠转移细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 Ca Ski人宫颈癌肠转移细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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ATCC CRL-1611(ACHN) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

NTCC CRL-1611(ACHN)标准细胞株基本信息 出品公司: NTCC 细胞名称: NTCC CRL-1611(ACHN), ACHN, 人肾细胞腺癌细胞 存储人: TF Hogan 种属来源: 人 组织来源: 肾 疾病特征: 肾细胞腺癌,胸水转移灶 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM，GIBCO,货号41500034)，90%；FBS，10%。 产品目录号: CRL-1611 生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 传代方法: 1：2至1：6，每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: ACHN可使用于干扰素或干扰素抗增殖的研究利用人类诱导。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11 D13S317: 12 D16S539: 12,13 D5S818: 12 D7S820: 9,11 THO1: 8 TPOX: 8,11 vWA: 16,17 同工酶: G6PD, B 参考文献: Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 10(7) cells The ACHN cell line was initiated in November, 1979 from the malignant pleural effusion of a 22-year-old Caucasian male with widely metastatic renal adenocarcinoma (autopsy confirmed). Cells were seeded directly to culture flasks in Eagle's MEM with 10% FBS, then maintained and passaged 150 days in flasks. Cells were then inoculated subcutaneously into nude mice. After 4 weeks, palpable, locally invasive tumors were noted. Both the original cells (ACHN) and those recovered from nude mouse tumors were growth-inhibited by human interferons. Kochevar J. Blockage of autonomous growth of ACHN cells by anti-renal cell carcinoma monoclonal antibody 5F4. Cancer Res. 20: 2968-2972, 1990. PubMed: 2334900 ACHN人肾细胞腺癌细胞特点和简介 人干扰素可抑制其生长[Hogan, T. F., 个人通讯]。 ACHN或能用于人干扰素、干扰素诱导因子的抗肿瘤活性研究。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。 ACHN人肾细胞腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 ACHN人肾细胞腺癌细胞培养操作 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类； 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 ACHN人肾细胞腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

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