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ATCC HTB-68(SK-MEL-2) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC HTB-68(SK-MEL-2),SK-MEL-2, 人恶性黑色素瘤细胞 存储人: G Trempe, LJ Old 种属来源: 人 组织来源: 皮肤 疾病特征: 恶性黑色素瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-68 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 10,12 D13S317: 10,11 D16S539: 8,9 D5S818: 11,12,13 D7S820: 11,12 TH01: 9 TPOX: 8,9 wVA: 16,17 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 PGM1, 1 PGM3, 1 参考文献: Fogh J. Human tumor cells in vitro. New York: Plenum Press; 1975. Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871 Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034 Landers JE, et al. Translational enhancement of mdm2 oncogene expression in human tumor cells containing a stabilized wild-type p53 protein. Cancer Res. 57: 3562-3568, 1997. PubMed: 9270029 Caputo JL. Biosafety procedures in cell culture. J. Tissue Culture Methods 11:223-227, 1988 NTCC HTB-68(SK-MEL-2)人恶性黑色素瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-68(SK-MEL-2)人恶性黑色素瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-68(SK-MEL-2)人恶性黑色素瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-68(SK-MEL-2)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-1585(C32) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-1585(C32), C32, 人恶性黑色素瘤细胞 存储人: TR Chen 种属来源: 人 组织来源: 皮肤 疾病特征: 恶性黑色素瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1585 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 12 D16S539: 11,12 D5S818: 12 D7S820: 9,11 THO1: 9.3 TPOX: 9 vWA: 14,19 参考文献: Chen TR. Evolution in vitro of stemlines with minimal karyotypic deviations in a human heteroploid cell line. J. Natl. Cancer Inst. 61: 277-284, 1978. PubMed: 277716 Chen TR, Shaw MW. Stable chromosome changes in human malignant melanoma. Cancer Res. 33: 2042-2047, 1973. PubMed: 4725368 NTCC CRL-1585(C32)人恶性黑色素瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-1585(C32)人恶性黑色素瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1585(C32)人恶性黑色素瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1585(C32)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC HTB-1(J82) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC HTB-1(J82), J82, 人膀胱癌细胞 种属来源: 人 组织来源: 膀胱 疾病特征: 移行细胞癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-1 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 10,11 D13S317: 10,12 D16S539: 11,12 D5S818: 12,13 D7S820: 9,11 THO1: 9.3 TPOX: 11,12 vWA: 17,18 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 1-2 PGM1, 1 PGM3, 2 参考文献: O'Toole CHuman bladder cancer lines: HLA Class I and Class II antigen expression and susceptibility to cytostatic and cytotoxic effects in vitroIn: O'Toole CIn vitro models for cancer researchvol. IVBoca Raton, FLCRC Presspp. 103-125. O'Toole C, et al. Ultrastructure, karyology and immunology of a cell line originated from a human transitional-cell carcinoma. Br. J. Cancer 38: 64-76, 1978. PubMed: 687519 Fogh J. Cultivation, characterization, and identification of human tumor cells with emphasis on kidney, testis, and bladder tumors. Natl. Cancer Inst. Monogr. 49: 5-9, 1978. PubMed: 571047 Bellet D, et al. Malignant transformation of nontrophoblastic cells is associated with the expression of chorionic gonadotropin beta genes normally transcribed in trophoblastic cells. Cancer Res. 57: 516-523, 1997. PubMed: 9012484 NTCC HTB-1(J82)人膀胱癌细胞特点和简介 该细胞源自一名58岁患有膀胱移行细胞癌的白人男性。胞内无桥粒,有大量粗面内质网及突出绒毛,表达ras基因。 NTCC HTB-1(J82)人膀胱癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-1(J82)人膀胱癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-1(J82)人膀胱癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-1(J82)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2137(SK-N-AS) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2137(SK-N-AS), SK-N-AS, 人脑神经母细胞瘤细胞 存储人: C Helson 种属来源: 人 组织来源: 脑 疾病特征: 脑神经母细胞瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2137 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10,12 D13S317: 9 D16S539: 14 D5S818: 11,12 D7S820: 11,13 THO1: 9.3 TPOX: 11,12 vWA: 16,17 参考文献: Sugimoto T, et al. Determination of cell surface membrane antigens common to both human neuroblastoma and leukemia-lymphoma cell lines by a panel of 38 monoclonal antibodies. J. Natl. Cancer Inst. 73: 51-57, 1984. PubMed: 6610792 Iavarone A, et al. Uptake and storage of m-iodobenzylguanidine are frequent neuronal functions of human neuroblastoma cell lines. Cancer Res. 53: 304-309, 1993. PubMed: 8417824 Gaetano C, et al. Retinoic acid negatively regulates p34cdc2 expression during human neuroblastoma differentiation. Cell Growth Differ. 2: 487-493, 1991. PubMed: 1751405 El-Badry OM, et al. Autonomous growth of a human neuroblastoma cell line is mediated by insulin-like growth factor II. J. Clin. Invest. 84: 829-839, 1989. PubMed: 2547840 NTCC CRL-2137(SK-N-AS)人脑神经母细胞瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2137(SK-N-AS)人脑神经母细胞瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2137(SK-N-AS)人脑神经母细胞瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2137(SK-N-AS)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-1690(T98G) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-1690(T98G), T98G, 人脑多形性成胶质细胞瘤 存储人: GH Stein 种属来源: 人 组织来源: 脑 疾病特征: 脑多形性成胶质细胞瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1690 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 10,12 D13S317: 13 D16S539: 13 D5S818: 10,12 D7S820: 9,10 THO1: 7,9.3 TPOX: 8 vWA: 17,20 参考文献: Stein GH. T98G: an anchorage-independent human tumor cell line that exhibits stationary phase G1 arrest in vitro. J. Cell. Physiol. 99: 43-54, 1979. PubMed: 222778 Olopade OI, et al. Molecular analysis of deletions of the short arm of chromosome 9 in human gliomas. Cancer Res. 52: 2523-2529, 1992. PubMed: 1568221 Rostomily RC, et al. Expression of neurogenic basic helix-loop-helix genes in primitive neuroectodermal tumors. Cancer Res. 57: 3526-3531, 1997. PubMed: 9270024 NTCC CRL-1690(T98G)人脑多形性成胶质细胞瘤接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-1690(T98G)人脑多形性成胶质细胞瘤培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1690(T98G)人脑多形性成胶质细胞瘤培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1690(T98G)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-1722(L5178-R) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-1722(L5178-R), L5178-R, 小鼠淋巴瘤细胞 存储人: JZ Beer 种属来源: 小鼠 组织来源: T淋巴细胞 疾病特征: 淋巴瘤 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1722 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: Beer JZ, et al. X-ray and UV mutagenesis in two L5178Y cell strains differing in tumorigenicity, radiosensitivity, and DNA repair. Br. J. Cancer Suppl. 6: 107-111, 1984. PubMed: 6582899 Beer JZ, et al. Loss of tumorigenicity with simultaneous changes in radiosensitivity and photosensitivity during in vitro growth of L5178Y murine lymphoma cells. Cancer Res. 43: 4736-4742, 1983. PubMed: 6883332 Beer JZ, et al. Effects of low dose rate (0.003-0.025 Gy/h) chronic X-irradiation on radioresistant and radiosensitive L5178Y mouse lymphoma cells. Int. J. Radiat. Biol. 48: 609-619, 1985. PubMed: 3876312 NTCC CRL-1722(L5178-R)小鼠淋巴瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-1722(L5178-R)小鼠淋巴瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1722(L5178-R)小鼠淋巴瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1722(L5178-R)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC TIB-203(2PK-3) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC TIB-203(2PK-3), 2PK-3, 小鼠B细胞淋巴瘤 存储人: NL Warner 种属来源: 小鼠 组织来源: 淋巴 疾病特征: 淋巴瘤 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: TIB-203 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 参考文献: . Membrane receptors of lymphocytes. Amsterdam: Elsevier/North Holland; 1975. Warner NL, et al. Flow cytometry analysis of murine B cell lymphoma differentiation. Immunol. Rev. 48: 197-243, 1979. PubMed: 161906 Lanier LL, et al. Quantitative immunofluorescent analysis of surface phenotypes of murine B cell lymphomas and plasmacytomas with monoclonal antibodies. J. Immunol. 127: 1691-1697, 1981. PubMed: 7024413 Brumeanu TD, et al. Immunogenicity of a contiguous T-B synthetic epitope of the A/PR/8/34 influenza virus. J. Virol. 71: 5473-5480, 1997. PubMed: 9188620 NTCC TIB-203(2PK-3)小鼠B细胞淋巴瘤接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC TIB-203(2PK-3)小鼠B细胞淋巴瘤培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC TIB-203(2PK-3)小鼠B细胞淋巴瘤培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC TIB-203(2PK-3)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC HTB-146(Hs 445) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC HTB-146(Hs 445), Hs 445, 人霍奇金淋巴瘤 存储人: RB Owens 种属来源: 人 组织来源: 淋巴 疾病特征: 霍奇金淋巴瘤 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-146 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11,10.3 D13S317: 11,13 D16S539: 9,11 D5S818: 9,12 D7S820: 9,10 THO1: 6,7 TPOX: 8 vWA: 14,17 同工酶: ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1-2 PGM1, 1 参考文献: Arnstein P, et al. Propagation of human tumors in antithymocyte serum-treated mice. J. Natl. Cancer Inst. 52: 71-84, 1974. PubMed: 4544026 Ohsugi Y, et al. Tumorigenicity of human malignant lymphoblasts: comparative study with unmanipulated nude mice, antilymphocyte serum-treated nude mice, and X- irradiated nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 65: 715-718, 1980. PubMed: 6932523 NTCC HTB-146(Hs 445)人霍奇金淋巴瘤接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-146(Hs 445)人霍奇金淋巴瘤培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-146(Hs 445)人霍奇金淋巴瘤培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-146(Hs 445)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC TIB-162(HuT 102) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC TIB-162(HuT 102), HuT 102, 人T淋巴瘤细胞 存储人: AF Gazdar 种属来源: 人 组织来源: T淋巴细胞 疾病特征: 淋巴癌 细胞形态: 淋巴母细胞 生长特性: 悬浮生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: TIB-162 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 8,11 D13S317: 11,13 D16S539: 12 D5S818: 8,13 D7S820: 8,10 THO1: 7,8 TPOX: 6 vWA: 16,19 参考文献: Gootenberg JE, et al. Human cutaneous T cell lymphoma and leukemia cell lines produce and respond to T cell growth factor. J. Exp. Med. 154: 1403-1418, 1981. PubMed: 6975346 Gazdar AF, et al. Mitogen requirements for the in vitro propagation of cutaneous T-cell lymphomas. Blood 55: 409-417, 1980. PubMed: 6244013 Hsu SM, et al. Expression of p55 (Tac) interleukin-2 receptor (IL-2R), but not p75 IL- 2R, in cultured H-RS cells and H-RS cells in tissues. Am. J. Pathol. 136: 735-744, 1990. PubMed: 1691591 Poiesz BJ, et al. Detection and isolation of type C retrovirus particles from fresh and cultured lymphocytes of a patient with cutaneous T-cell lymphoma. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 7415-7419, 1980. PubMed: 6261256 NTCC TIB-162(HuT 102)人T淋巴瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC TIB-162(HuT 102)人T淋巴瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC TIB-162(HuT 102)人T淋巴瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC TIB-162(HuT 102)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CCL-17(KB) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CCL-17(KB), KB, 人口腔表皮样癌细胞 存储人: H Eagle 种属来源: 人 组织来源: 口腔 疾病特征: 表皮样癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-17 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 9,10 D13S317: 12,13.3 D16S539: 9,10 D5S818: 11,12 D7S820: 8,12 THO1: 7 TPOX: 8,12 vWA: 16,18 同工酶: G6PD, A 备注: Nucleotide (GenBank) : AW062989 EST00001 PT-PCR products Homo sapiens cDNA clone K-5, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : AW062990 EST00002 PT-PCR products Homo sapiens cDNA clone K-13, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : AW062991 EST00003 PT-PCR products Homo sapiens cDNA clone K-16, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : AW062992 EST00004 PT-PCR products Homo sapiens cDNA clone K-32, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : AW062993 EST00005 PT-PCR products Homo sapiens cDNA clone K-33, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : AW062994 EST00006 PT-PCR products Homo sapiens cDNA clone K-34, mRNA sequence. Nucleotide (GenBank) : AW062995 EST00007 PT-PCR products Homo sapiens cDNA clone K-45, mRNA sequence. 参考文献: Eagle H. Propagation in a fluid medium of a human epidermoid carcinoma, strain KB. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 89: 362-364, 1955. PubMed: 13254761 Boshart M, et al. A new type of papillomavirus DNA, its presence in genital cancer biopsies and in cell lines derived from cervical cancer. EMBO J. 3: 1151-1157, 1984. PubMed: 6329740 Salzman NP. Animal Cell Cultures. Science 133:1559-65. 1961 PubMed: 13745868 Eagle H, Foley GE. Cytotoxicity in human cell cultures as a primary screen for the detection of anti-tumor agents. Cancer Res. 18: 1017-1025, 1958. PubMed: 13596943 Foley GE, Handler AH. Differentiation of “Normal” and Neoplastic Cells Maintained in Tissue Culture by Implantation into Normal Hamsters. Proc Soc Exp Biol Med 94: 661-664 1957. PubMed: 13431913 NTCC CCL-17(KB)人口腔表皮样癌细胞特点和简介 最初认为这个细胞源自口腔表皮癌,但随后通过同工酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹分析发现,起源细胞已被HeLa污染。角蛋白阳性。有报告称,KB细胞含有人乳头状瘤病毒18 (HPV-18)序列。 NTCC CCL-17(KB)人口腔表皮样癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CCL-17(KB)人口腔表皮样癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-17(KB)人口腔表皮样癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-17(KB)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CCL-8(CCRF S-180 II) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CCL-8(CCRF S-180 II), CCRF S-180 II, 小鼠肉瘤细胞 存储人: GE Foley 种属来源: 小鼠 组织来源: 结缔组织 疾病特征: 肉瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-8 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞试验发现负鼠痘病毒(痘)。 参考文献: Foley GE, et al. Isolation and serial propagation of malignant and normal cells in semi-defined media. Origins of CCRF cell lines. Cancer Res. 20: 930-939, 1960. PubMed: 13823721 Foley EG, Drolet BP. Sustained propagation of sarcoma of 180 in tissue culture. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 92: 347-352, 1956. PubMed: 13350343 NTCC CCL-8(CCRF S-180 II)小鼠肉瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联 系。 NTCC CCL-8(CCRF S-180 II)小鼠肉瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基 混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜) 。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作 台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后 ,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清 和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液 ,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记 录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-8(CCRF S-180 II)小鼠肉瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生 请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞 因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担 。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少 量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若 细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养 基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您 再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时 可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知 细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-8(CCRF S-180 II)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CCL-23(HEp-2) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CCL-23(HEp-2),HEp-2, 人喉癌上皮细胞 存储人: AE Moore 种属来源: 人 组织来源: 喉 疾病特征: 喉癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-23 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 9,10 D13S317: 12,13.3 D16S539: 9,10 D5S818: 11,12 D7S820: 8,12 THO1: 7 TPOX: 8,12 vWA: 16,18 同工酶: G6PD, A 参考文献: Moore AE, et al. Culture characteristics of four permanent lines of human cancer cells. Cancer Res. 15: 598-602, 1955. PubMed: 13261081 Chen TR. Re-evaluation of HeLa, HeLa S3, and HEp-2 karyotypes. Cytogenet. Cell Genet. 48: 19-24, 1988. PubMed: 3180844 Toolan HW. Transplantable human neoplasms maintained in cortisone-treated laboratory animals: H.S. No. 1; H.Ep. No. 1; H.Ep. No. 2; H.Ep. No. 3; and H.Emb.Rh. No. 1. Cancer Res. 14: 660-666, 1954. PubMed: 13209540 Black FL, et al. Propagation of measles virus in a strain of human epidermoid cancer cells (Hep-2). Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 93: 107-108, 1956. PubMed: 13370591 Tex. Rep. Biol. Med. 15: 588, 1957. NTCC CCL-23(HEp-2)人喉癌上皮细胞特点和简介 最初认为这个细胞源自喉上皮癌,但随后通过同功酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹分析发现,起源细胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。 NTCC CCL-23(HEp-2)人喉癌上皮细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联 系。 NTCC CCL-23(HEp-2)人喉癌上皮细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基 混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜) 。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作 台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后 ,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清 和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液 ,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记 录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-23(HEp-2)人喉癌上皮细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生 请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞 因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担 。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少 量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若 细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养 基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您 再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时 可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知 细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-23(HEp-2)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2974(MM.1S) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2974(MM.1S), MM.1S, 人lambda骨髓瘤细胞 存储人: S. Rosen 种属来源: 人 组织来源: 骨 疾病特征: 骨髓瘤 细胞形态: 生长特性: 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2974 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: D5S818: 8, 12 D13S317: 13 D7S820: 10, 11 D16S539: 12 vWA: 15, 17 THO1: 7, 8 TPOX: 8 Amelogenin: X CSF1PO: 9,14 参考文献: Goldman-Leikin RE, et al. Characterization of a novel myeloma cell line, MM.1. J. Lab. Clin. Med. 113(3):335-345, 1989. PubMed: 2926241 Greenstein S, et al. Characterization of the MM.1 human multiple myeloma (MM) cell lines: A model system to elucidate the characteristics, behavior, and signaling of steroid-sensitive and -resistant MM cells. Exp. Hematol.: 31:271-282, 2003. PubMed; 12691914 Moalli PA, et al. A mechanism of resistance to glucocorticoids in multiple myeloma: transient expression of a truncated glucocorticoid receptor mRNA. Blood. 79:213-222, 1992. PubMed: 1728309 Greenstein S, et al. Characterization of the MM.1 human multiple myeloma (MM) cell lines: A model system to elucidate the characteristics, behavior, and signaling of steroid-sensitive and -resistant MM cells. Exp. Hematol.: 31:271-282, 2003. PubMed; 12691914 NTCC CRL-2974(MM.1S)人lambda骨髓瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联 系。 NTCC CRL-2974(MM.1S)人lambda骨髓瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基 混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜) 。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作 台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后 ,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清 和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液 ,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记 录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2974(MM.1S)人lambda骨髓瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生 请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞 因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担 。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少 量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若 细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养 基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您 再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时 可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知 细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2974(MM.1S)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-1544(KHOS/NP) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-1544(KHOS/NP), KHOS/NP, 人骨肉瘤细胞 存储人: JS Rhim 种属来源: 人 组织来源: 骨 疾病特征: 骨肉瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1544 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞是用于各种热带和MSV颗粒产生异嗜性小鼠白血病病毒。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 12 D16S539: 10,13 D5S818: 13 D7S820: 11,12 THO1: 6 TPOX: 8,11 vWA: 18 参考文献: Rhim JS, et al. Non-producer human cells induced by murine sarcoma virus. Int. J. Cancer 15: 23-29, 1975. PubMed: 165148 Rhim JS, et al. Characterization of non-producer human cells induced by Kirsten sarcoma virus. Int. J. Cancer 16: 840-849, 1975. PubMed: 171229 NTCC CRL-1544(KHOS/NP)人骨肉瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养 基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联 系。 NTCC CRL-1544(KHOS/NP)人骨肉瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基 混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有 细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜) 。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作 台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后 ,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清 和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液 ,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记 录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1544(KHOS/NP)人骨肉瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生 请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞 因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担 。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少 量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若 细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养 基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您 再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时 可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知 细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1544(KHOS/NP)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2026(Hepa-1c1c7) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2026(Hepa-1c1c7), Hepa-1c1c7, 小鼠肝癌细胞 存储人: O Hankinson 种属来源: 小鼠 组织来源: 肝脏 疾病特征: 肝癌,肝腹水 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2026 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 参考文献: Bernhard HP, et al. Expression of liver phenotypes in cultured mouse hepatoma cells: synthesis and secretion of serum albumin. Dev. Biol. 35: 83-96, 1973. PubMed: 4362668 Hankinson O, et al. Genetic and molecular analysis of the Ah receptor and of Cyp1a1 gene expression. Biochimie 73: 61-66, 1991. PubMed: 1851644 Hankinson O. Single-step selection of clones of a mouse hepatoma line deficient in aryl hydrocarbon hydroxylase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 76: 373-376, 1979. PubMed: 106390 NTCC CRL-2026(Hepa-1c1c7)小鼠肝癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2026(Hepa-1c1c7)小鼠肝癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2026(Hepa-1c1c7)小鼠肝癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2026(Hepa-1c1c7)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2238(SNU-423) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2238(SNU-423), SNU-423, 人肝癌细胞 存储人: J Park 种属来源: 人 组织来源: 肝脏 疾病特征: 肝癌,肝腹水 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2238 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 10,13 D16S539: 9 D5S818: 10 D7S820: 12 THO1: 6,9 TPOX: 8 vWA: 15 参考文献: Park JG, et al. Characterization of cell lines established from human hepatocellular carcinoma. Int. J. Cancer 62: 276-282, 1995. PubMed: 7543080 NTCC CRL-2238(SNU-423)人肝癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2238(SNU-423)人肝癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2238(SNU-423)人肝癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2238(SNU-423)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2235(SNU-182) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2235(SNU-182), SNU-182, 人肝癌细胞 存储人: J Park 种属来源: 人 组织来源: 肝脏 疾病特征: 肝癌,肝腹水 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2235 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 10,12 D13S317: 11,14 D16S539: 11,13 D5S818: 11,12 D7S820: 11 THO1: 9 TPOX: 8,11 vWA: 17 参考文献: Park JG, et al. Characterization of cell lines established from human hepatocellular carcinoma. Int. J. Cancer 62: 276-282, 1995. PubMed: 7543080 NTCC CRL-2235(SNU-182)人肝癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2235(SNU-182)人肝癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2235(SNU-182)人肝癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2235(SNU-182)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC HTB-172(NCI-H209) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC HTB-172(NCI-H209), NCI-H209, 人小细胞肺癌细胞 存储人: AF Gazdar, JD Minna 种属来源: 人 组织来源: 肺 疾病特征: 肺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 悬浮聚集生长 培养基: RPMI-1640,90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-172 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11 D13S317: 11 D16S539: 9,12 D5S818: 12 D7S820: 9 THO1: 7,9 TPOX: 8 vWA: 18,19 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B Me-2, 0 PGM1, 1-2 PGM3, 1 备注: Nucleotide (GenBank) : A93403 Sequence 1 from Patent WO9741834. Nucleotide (GenBank) : A93404 Sequence 2 from Patent WO9741834. 参考文献: Little CD, et al. Amplification and expression of the c-myc oncogene in human lung cancer cell lines. Nature 306: 194-196, 1983. PubMed: 6646201 Takahashi T, et al. p53: A frequent target for genetic abnormalities in lung cancer. Science 246: 491-494, 1989. PubMed: 2554494 Carney DN, et al. Establishment and identification of small cell lung cancer cell lines having classic and variant features. Cancer Res. 45: 2913-2923, 1985. PubMed: 2985257 Hensel CH, et al. Altered structure and expression of the human retinoblastoma susceptibility gene in small cell lung cancer. Cancer Res. 50: 3067-3072, 1990. PubMed: 2159370 Kaye FJ, et al. A single amino acid substitution results in a retinoblastoma protein defective in phosphorylation and oncoprotein binding. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 6922-6926, 1990. PubMed: 2168563 NTCC HTB-172(NCI-H209)人小细胞肺癌细胞特点和简介 该细胞由Gazdar AF及其同事于1979年从一名小细胞肺癌患者的骨髓转移灶中分离建立,该骨髓标本的获取先于患者的治疗。该细胞是一种典型的小细胞性肺癌细胞,表达较高水平的4种生化标志:神经特异性烯醇、肌酸激酶脑型同工酶、左旋多巴脱羧酶、铃蟾肽样免疫活性。c-myc DNA序列没有扩增;未发现大的结构DNA的异常;该细胞合成与正常肺相当量的p53 mRNA。该细胞以聚集体的形式悬浮生长,只有聚集体中的细胞是有活力的,但是细胞活率无法估计,一般培养基中含有大量的细胞碎片。该细胞表达异常的RB1蛋白,其706 NTCC HTB-172(NCI-H209)人小细胞肺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-172(NCI-H209)人小细胞肺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-172(NCI-H209)人小细胞肺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-172(NCI-H209)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-5815(NCI-H727) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-5815(NCI-H727), NCI-H727, 人肺支气管良性肿瘤 存储人: GAF Gazdar, JD Minna 种属来源: 人 组织来源: 肺 疾病特征: 支气管良性肿瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-5815 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11,12 D13S317: 11 D16S539: 11,13 D5S818: 11,12 D7S820: 8,10 THO1: 8 TPOX: 8 vWA: 14,15 参考文献: Takahashi T, et al. p53: A frequent target for genetic abnormalities in lung cancer. Science 246: 491-494, 1989. PubMed: 2554494 Brandt DW, et al. Calcium-stimulated parathyroid hormone-like protein secretion: potentiation through a protein kinase-C pathway. Endocrinology 128: 2999-3004, 1991. PubMed: 2036974 Giaccone G, et al. Neuromedin B is present in lung cancer cell lines. Cancer Res. 52: 2732s-2736s, 1992. PubMed: 1563005 NCI-Navy Medical Oncology Branch Cell Line Supplement. J. Cell. Biochem. suppl. 24: 1996. Natl. Cancer Inst. Monogr. 13: 117-123, 1992. NTCC CRL-5815(NCI-H727)人肺支气管良性肿瘤接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-5815(NCI-H727)人肺支气管良性肿瘤培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-5815(NCI-H727)人肺支气管良性肿瘤培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-5815(NCI-H727)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2177(SW 1271) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2177(SW 1271), SW 1271, 人小细胞肺癌细胞 存储人: W McCombs 种属来源: 人 组织来源: 肺 疾病特征: 肺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2177 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11 D13S317: 13 D16S539: 11,12 D5S818: 12 D7S820: 9,12 THO1: 7,8 TPOX: 8 vWA: 17,20 参考文献: Hay, R. J., Caputo, J. L., and Macy, M. L., Eds. (1992), NTCC Quality Control Methods for Cell Lines. 2nd edition, Published by NTCC. Caputo, J. L., Biosafety procedures in cell culture. J. Tissue Culture Methods 11:223-227, 1988. Fleming, D.O., Richardson, J. H., Tulis, J.J. and Vesley, D., (1995) Laboratory Safety: Principles and Practice. Second edition, ASM press, Washington, DC. NTCC CRL-2177(SW 1271)人小细胞肺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2177(SW 1271)人小细胞肺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2177(SW 1271)人小细胞肺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2177(SW 1271)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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