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2017-02-15

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ATCC CRL-1929(SUP-B15) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-1929(SUP-B15), SUP-B15, 人Ph+急淋白血病细胞系 存储人: SD Smith 种属来源: 人 组织来源: 骨髓 疾病特征: Ph+急淋白血病 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: IMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1929 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 8,14 D16S539: 11,12 D5S818: 12,13 D7S820: 10,11 THO1: 6,9.3 TPOX: 8,9 vWA: 15,17 参考文献: Fainstein E, et al. A new fused transcript in Philadelphia chromosome positive acute lymphocytic leukaemia. Nature 330: 386-389, 1987. PubMed: 2825022 Clark SS, et al. Expression of a distinctive BCR-ABL oncogene in Ph1-positive acute lymphocytic leukemia (ALL). Science 239: 775-777, 1988. PubMed: 3422516 Naumovski L, et al. Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic leukemia cell lines without classical breakpoint cluster region rearrangement. Cancer Res. 48: 2876-2879, 1988. PubMed: 3162827 NTCC CRL-1929(SUP-B15)人Ph+急淋白血病细胞系特点和简介 这株细胞来源于一位B细胞全部为费城染色体阳性的8岁小孩的骨髓。 这些细胞表达多个B细胞标记,但不表达T细胞标记。 β-2 微球蛋白,Leu12,My7 (CD13), OKT9 (CD71), OKT10 (CD38) 及 CALLA (CD10)抗体阳性。 CB1, Leu 1 (CD5), Leu2 (CD8), Leu3 (CD4), Leu4 (CD3), Leu5 (CD2), Leu6 (CD1a), Leu9, Leu M1 (CD15), My9 (CD33), 表面抗原 (sIg -) 及 Epstein-Barr 病毒阴性。 NTCC CRL-1929(SUP-B15)人Ph+急淋白血病细胞系接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-1929(SUP-B15)人Ph+急淋白血病细胞系培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1929(SUP-B15)人Ph+急淋白血病细胞系培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1929(SUP-B15)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CCL-85(EB-3) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CCL-85(EB-3), EB-3, 人伯基特淋巴瘤细胞 存储人: W Henle 种属来源: 人 组织来源: 淋巴 疾病特征: 淋巴瘤 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: RPMI-1640,90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-85 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 12,15 D13S317: 12,14 D16S539: 10,12 D5S818: 9,10 D7S820: 11 THO1: 7 TPOX: 6,9 vWA: 17,19 同工酶: G6PD, A 参考文献: Henle G, et al. Relation of Burkitt's tumor-associated herpes-ytpe virus to infectious mononucleosis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 59: 94-101, 1968. PubMed: 5242134 Epstein MA, Barr YM. Cultivation in vitro of human lymphoblasts from Burkitt's malignant lymphoma. Lancet 1: 252-253, 1964. PubMed: 14090852 NTCC CCL-85(EB-3)人伯基特淋巴瘤细胞特点和简介 该细胞源自一名3岁患有Burkitt's淋巴瘤的黑人男孩的B淋巴细胞,EBNA阳性。 NTCC CCL-85(EB-3)人伯基特淋巴瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CCL-85(EB-3)人伯基特淋巴瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-85(EB-3)人伯基特淋巴瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-85(EB-3)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC HTB-186(Daoy) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC HTB-186(Daoy), Daoy, 人髓母细胞瘤细胞 存储人: HS Friedman 种属来源: 人 组织来源: 髓质 疾病特征: 髓母细胞瘤 细胞形态: 多角形 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-186 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11 D13S317: 13,14 D16S539: 10 D5S818: 11,13 D7S820: 8,10 THO1: 9 TPOX: 8,10 vWA: 14,20 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1-2 G6PD, B GLO-I, 1 Me-2, 1 PGM1, 2 PGM3, 1-2 参考文献: He XM, et al. Expression of O6-methylguanine-DNA methyltransferase in six human medulloblastoma cell lines. Cancer Res. 52: 1144-1148, 1992. PubMed: 1737373 Jacobsen PF, et al. Establishment of a human medulloblastoma cell line and its heterotransplantation into nude mice. J. Neuropathol. Exp. Neurol. 44: 472-485, 1985. PubMed: 2993532 Rostomily RC, et al. Expression of neurogenic basic helix-loop-helix genes in primitive neuroectodermal tumors. Cancer Res. 57: 3526-3531, 1997. PubMed: 9270024 NTCC HTB-186(Daoy)人髓母细胞瘤细胞特点和简介 人髓母细胞瘤细胞,每支细胞量1×106 NTCC HTB-186(Daoy)人髓母细胞瘤细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-186(Daoy)人髓母细胞瘤细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-186(Daoy)人髓母细胞瘤细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-186(Daoy)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-9444(MeT-5A) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-9444(MeT-5A), MeT-5A, 人膜间皮细胞 存储人: The United States of America 种属来源: 人 组织来源: 皮肤 疾病特征: 正常 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: Medium 199,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-9444 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 10,12 D13S317: 11,13 D16S539: 12 D5S818: 12 D7S820: 10 THO1: 6,9.3 TPOX: 8 vWA: 15,18 参考文献: Reddel RR, et al. Immortalized human bronchial epitherial mesothelial cell lines. US Patent 4,885,238 dated Dec 5 1989 Lechner JF, et al. Asbestos-associated chromosomal changes in human mesothelial cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82: 3884-3888, 1985. PubMed: 2987952 NTCC CRL-9444(MeT-5A)人膜间皮细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-9444(MeT-5A)人膜间皮细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-9444(MeT-5A)人膜间皮细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-9444(MeT-5A)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2522(BJ) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2522(BJ),BJ, 人皮肤成纤维细胞 存储人: JR Smith 种属来源: 人 组织来源: 皮肤 疾病特征: 正常 细胞形态: 成纤维细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2522 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 10,12 D13S317: 8,9 D16S539: 9,13 D5S818: 12 D7S820: 11,12 THO1: 7,8 TPOX: 10,11 vWA: 16,18 参考文献: Yi X, et al. Both transcriptional and posttranscriptional mechanisms regulate human telomerase template RNA levels. Mol. Cell. Biol. 19(6): 3989-3997, 1999. PubMed: 10330139 Bodnar AG, et al. Extension of life-span by introduction of telomerase into normal human cells. Science 279: 349-352, 1998. PubMed: 9454332 Huffman KE, et al. Telomere shortening is proportional to the size of the G-rich telomeric 3'-overhang. J. Biol. Chem. 275: 19719-19722, 2000. PubMed: 10787419 Morales CP, et al. Absence of cancer-associated changes in human fibroblasts immortalized with telomerase. Nat. Genet. 21: 115-118, 1999. PubMed: 9916803 NTCC CRL-2522(BJ)人皮肤成纤维细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2522(BJ)人皮肤成纤维细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2522(BJ)人皮肤成纤维细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2522(BJ)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC HTB-111(AN3 CA) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC HTB-111(AN3 CA), AN3 CA, 人子宫内膜腺癌(转移)细胞 存储人: CJ Dawe 种属来源: 人 组织来源: 子宫 疾病特征: 子宫内膜腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-111 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12,14,15 D13S317: 12,14 D16S539: 10,14 D5S818: 11,14 D7S820: 7,10,7.1 THO1: 10,9.3 TPOX: 8,10 vWA: 14,20 同工酶: AK-1, 1-2 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 PGM1, 1 PGM3, 1-2 参考文献: Dawe CJ, et al. Growth in continuous culture, and in hamsters, of cells from a neoplasma assoicated with Acanthosis nigricans. J. Natl. Cancer Inst. 33: 441-456, 1964. PubMed: 14207855 Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034 Hendricks DT, et al. FHIT gene expression in human ovarian, endometrial, and cervical cancer cell lines. Cancer Res. 57: 2112-2115, 1997. PubMed: 9187105 The cells produce undifferentiated malignant tumors. at low frequency (22%) NTCC HTB-111(AN3 CA)人子宫内膜腺癌(转移)细胞特点和简介 AN3CA细胞建系于1964年。它衍生于子宫内膜癌患者淋巴结转移组织,具有癌细胞的基本特性,能在体外长期传代培养,接种实验动物产生明显肿瘤。但细胞的生物学特性及超微结构尚未深入研究,仅发现该细胞系促黑激素合成为阴性。细胞常用于人子宫内膜癌细胞生物学及其相关特性研究。 NTCC HTB-111(AN3 CA)人子宫内膜腺癌(转移)细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-111(AN3 CA)人子宫内膜腺癌(转移)细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-111(AN3 CA)人子宫内膜腺癌(转移)细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-111(AN3 CA)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CCL-2.2(HeLa S3) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CCL-2.2(HeLa S3), HeLa S3, 人宫颈癌细胞 存储人: TT Puck 种属来源: 人 组织来源: 子宫 疾病特征: 宫颈癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: F-12K,90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-2.2 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 9,10 D13S317: 13.3 D16S539: 9,10 D5S818: 11,12 D7S820: 8,12 THO1: 7 TPOX: 8,12 vWA: 16,18 同工酶: G6PD, A 备注: Nucleotide (GenBank) : Y09723 H.sapiens mRNA for Miz-1 protein. Nucleotide (GenBank) : Y08698 H.sapiens mRNA for RanBP3 (59 kDa). Nucleotide (GenBank) : Y08699 H.sapiens mRNA for RanBP3, splice variant. Nucleotide (GenBank) : U25182 Human antioxidant enzyme AOE37-2 mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : U33822 Human tax1-binding protein TXBP181 mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : U43430 Human epsilon isoform 14-3-3 protein mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : Y08697 H.sapiens mRNA for RanBP3 small splice variant (53 kDa). Nucleotide (GenBank) : L15328 Saccharomyces cerevisiae RNA helicase gene, complete cds. Nucleotide (GenBank) : U33821 Homo sapiens tax1-binding protein TXBP151 mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : NM_003443 Homo sapiens zinc finger protein 151 (pHZ-67) (ZNF151), mRNA. Nucleotide (GenBank) : AF034102 Homo sapiens NBMPR-insensitive nucleoside transporter ei (ENT2) mRNA, complete cds. Nucleotide (GenBank) : NM_006024 Homo sapiens Tax1 (human T-cell leukemia virus type I) binding protein 1 (TAX1BP1), mRNA. 参考文献: Chen TR. Re-evaluation of HeLa, HeLa S3, and HEp-2 karyotypes. Cytogenet. Cell Genet. 48: 19-24, 1988. PubMed: 3180844 Boshart M, et al. A new type of papillomavirus DNA, its presence in genital cancer biopsies and in cell lines derived from cervical cancer. EMBO J. 3: 1151-1157, 1984. PubMed: 6329740 Puck TT, et al. Clonal growth of mammalian cells in vitro; growth characteristics of colonies from single HeLa cells with and without a feeder layer. J. Exp. Med. 103: 273-283, 1956. PubMed: 13286432 Yee C, et al. Presence and expression of human papillomavirus sequences in human cervical carcinoma cell lines. Am. J. Pathol. 119: 361-366, 1985. PubMed: 2990217 Puck TT, Marcus PI. A rapid method for viable cell titration and clone production with HeLa cells in tissue culture: the use of x-irradiated cells to supply conditioning factors. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 41: 432-437, 1955. NTCC CCL-2.2(HeLa S3)人宫颈癌细胞特点和简介 该细胞是1955年由Puck TT, Marcus PI和Cieciura SJ建系的,含HPV-18序列;角蛋白阳性;可用于与染色体突变、细胞营养、集落形成相关的哺乳动物细胞的克隆分析。 NTCC CCL-2.2(HeLa S3)人宫颈癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CCL-2.2(HeLa S3)人宫颈癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-2.2(HeLa S3)人宫颈癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-2.2(HeLa S3)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CCL-98(BeWo) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CCL-98(BeWo),BeWo, 人胎盘绒膜癌细胞 存储人: RA Pattillo 种属来源: 人 组织来源: 胎盘 疾病特征: 胎盘绒膜癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-98 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 9,11 D16S539: 13,14 D5S818: 10,11 D7S820: 10,12 THO1: 9,9.3 TPOX: 8 vWA: 16 同工酶: G6PD, B 参考文献: Pattillo RA, et al. Human hormone production in vitro. Science 159: 1467-1469, 1968. PubMed: 5753554 Pattillo RA, et al. Control mechanisms for gonadotrophic hormone production in vitro. In Vitro 6: 205-214, 1970. PubMed: 5535575 Pattillo RA, et al. Estrogen production by trophoblastic tumors in tissue culture. J. Clin. Endocrinol. Metab. 34: 59-61, 1972. PubMed: 4332667 Pattillo RA, Gey GO. The establishment of a cell line of human hormone-synthesizing trophoblastic cells in vitro. Cancer Res. 28: 1231-1236, 1968. PubMed: 4299001 Hertz R. Choriocarcinoma of women maintained in serial passage in hamster and rat. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 102: 77-81, 1959. PubMed: 14401422 NTCC CCL-98(BeWo)人胎盘绒膜癌细胞特点和简介 取自人绒癌脑转移组织,在仓鼠颊囊移植传代8年。利用移植瘤组织进行体外培养,建立细胞系。利用不同传代方法建立了不同亚系,JEG-3是其衍生克隆。该细胞可以产生雌激素、孕激素、雌酮、雌二醇、雌三醇、hCG、胎盘催乳素、角蛋白。 NTCC CCL-98(BeWo)人胎盘绒膜癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CCL-98(BeWo)人胎盘绒膜癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-98(BeWo)人胎盘绒膜癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-98(BeWo)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-5973(SNU-5) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-5973(SNU-5), SNU-5, 人胃癌细胞 存储人: J Park 种属来源: 人 组织来源: 胃 疾病特征: 胃癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 多细胞聚集、悬浮生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-5973 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 12 D13S317: 8,9 D16S539: 13 D5S818: 10 D7S820: 8,12 THO1: 9 TPOX: 11 vWA: 15,16 参考文献: Park JG, et al. Characteristics of cell lines established from human gastric carcinoma. Cancer Res. 50: 2773-2780, 1990. PubMed: 2158397 NCI-Navy Medical Oncology Branch Cell Line Supplement. J. Cell. Biochem. suppl. 24: 1996. NTCC CRL-5973(SNU-5)人胃癌细胞特点和简介 该细胞来源于一名低分化胃癌患者的转移性腹水,1987年分离建立。该细胞表达CEA和TAG-72。 NTCC CRL-5973(SNU-5)人胃癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-5973(SNU-5)人胃癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-5973(SNU-5)人胃癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-5973(SNU-5)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-1730(HUV-EC-C) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-1730(HUV-EC-C), HUV-EC-C, 人脐静脉内皮细胞 存储人: H Hoshi 种属来源: 人 组织来源: 脐静脉 疾病特征: 正常 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1730 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11,12 D13S317: 9,11 D16S539: 11,12 D5S818: 11,12 D7S820: 8,12 THO1: 6,9.3 TPOX: 8,11 vWA: 16 参考文献: Molestina RE, et al. Characterization of a strain of Chlamydia pneumoniae isolated from a coronary atheroma by analysis of the omp1 gene and biological activity in human endothelial cells. Infect. Immun. 66: 1370-1376, 1998. PubMed: 9529055 Zahedi K. Characterization of the binding of serum amyloid P to laminin. J. Biol. Chem. 272: 2143-2148, 1997. PubMed: 8999915 Lindstrom AL, et al. An in vitro model for toxin-mediated vascular leak syndrome: ricin toxin A chain increases the permeability of human endothelial cell monolayers. Blood 90: 2323-2334, 1997. PubMed: 9310483 NTCC CRL-1730(HUV-EC-C)人脐静脉内皮细胞特点和简介 该细胞可用于血管内皮修复损伤的研究。 NTCC CRL-1730(HUV-EC-C)人脐静脉内皮细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-1730(HUV-EC-C)人脐静脉内皮细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1730(HUV-EC-C)人脐静脉内皮细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1730(HUV-EC-C)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2123(mlMCD-3) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2123(mlMCD-3), mlMCD-3, 小鼠肾髓质细胞 存储人: S Gullans 种属来源: 小鼠 组织来源: 肾 疾病特征: 正常 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2123 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 参考文献: Rauchman MI, et al. An osmotically tolerant inner medullary collecting duct cell line from an SV40 transgenic mouse. Am. J. Physiol. 265: F416-F424, 1993. PubMed: 8214101 NTCC CRL-2123(mlMCD-3)小鼠肾髓质细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2123(mlMCD-3)小鼠肾髓质细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2123(mlMCD-3)小鼠肾髓质细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2123(mlMCD-3)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2038(M-1) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2038(M-1), M-1, 小鼠骨髓性白血病细胞 存储人: G Fejes-Toth 种属来源: 小鼠 组织来源: 骨髓 疾病特征: 骨髓性白血病 细胞形态: 淋巴母细胞 生长特性: 悬浮生长 培养基: RPMI-1640,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2038 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 参考文献: Fejes-Toth G, Naray-Fejes-Toth A. Differentiation of renal beta-intercalated cells to alpha-intercalated and principal cells in culture. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 5487-5491, 1992. PubMed: 1608958 Stoos BA, et al. Characterization of a mouse cortical collecting duct cell line. Kidney Int. 39: 1168-1175, 1991. PubMed: 1654478 Hay, R. J., Caputo, J. L., and Macy, M. L., Eds. (1992), NTCC Quality Control Methods for Cell Lines. 2nd edition, Published by NTCC. Caputo, J. L., Biosafety procedures in cell culture. J. Tissue Culture Methods 11:223-227, 1988. NTCC CRL-2038(M-1)小鼠骨髓性白血病细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2038(M-1)小鼠骨髓性白血病细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2038(M-1)小鼠骨髓性白血病细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2038(M-1)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2610(LN-18) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2610(LN-18), LN-18, 人脑胶质母细胞瘤 存储人: N de Tribolet 种属来源: 人 组织来源: 脑 疾病特征: 脑胶质母细胞瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2610 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞系用于细胞凋亡的研究。 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 12 D13S317: 12,13 D16S539: 11,13 D5S818: 11,13 D7S820: 8,10 THO1: 9 TPOX: 8 vWA: 17,18 参考文献: Diserens AC, et al. Characterization of an established human malignant glioma cell line: LN-18. Acta Neuropathol. 53: 21-28, 1981. PubMed: 7211194 Ishii N, et al. Frequent co-alterations of TP53, p16/CDKN2A, p14ARF, PTEN tumor suppressor genes in human glioma cell lines. Brain Pathol. 9: 469-479, 1999. PubMed: 10416987 Schlapbach R, Fontana A. Differential activity of bcl-2 and ICE enzyme family protease inhibitors on Fas and puromycin-induced apoptosis of glioma cells.. Biochim. Biophys. Acta 1359: 174-180, 1997. PubMed: 9409814 NTCC CRL-2610(LN-18)人脑胶质母细胞瘤接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2610(LN-18)人脑胶质母细胞瘤培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2610(LN-18)人脑胶质母细胞瘤培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2610(LN-18)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC HTB-148(H4) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC HTB-148(H4), H4, 人脑神经胶质瘤 存储人: J Riggs 种属来源: 人 组织来源: 脑 疾病特征: 脑神经胶质瘤 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: HTB-148 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X,Y CSF1PO: 10,12 D13S317: 12 D16S539: 11,12 D5S818: 10,12 D7S820: 8,11 THO1: 7,9 TPOX: 8,11 vWA: 14,18 同工酶: AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 2 Me-2, 0 PGM1, 1-2 PGM3, 1 参考文献: Arnstein P, et al. Propagation of human tumors in antithymocyte serum-treated mice. J. Natl. Cancer Inst. 52: 71-84, 1974. PubMed: 4544026 Day RS, Ziolkowski CH. Human brain tumour cell strains with deficient host-cell reactivation of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine-damaged adenovirus 5. Nature 279: 797-799, 1979. PubMed: 450131 NTCC HTB-148(H4)人脑神经胶质瘤特点和简介 H4细胞系建系于1973年。它衍生于一个患神经胶质瘤的37岁病人的脑组织。该细胞的致瘤特性己经被屏蔽,细胞接种动物一般不产生肿瘤结节。该细胞具有修复MNNG损伤5型腺病毒的能力。 NTCC HTB-148(H4)人脑神经胶质瘤接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC HTB-148(H4)人脑神经胶质瘤培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC HTB-148(H4)人脑神经胶质瘤培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC HTB-148(H4)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CCL-13(Chang Liver) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CCL-13(Chang Liver),Chang Liver, 人子宫颈癌细胞 存储人: RS Chang 种属来源: 人 组织来源: 子宫 疾病特征: 子宫颈癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: MEM培养基(MEM,GIBCO,货号41500034),90%;FBS,10%。 产品目录号: CCL-13 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 10 D13S317: 12,13.3 D16S539: 9,10 D5S818: 12 D7S820: 8,12 THO1: 7 TPOX: 8,12 vWA: 16,18 同工酶: G6PD, A 参考文献: Chang RS. Continuous subcultivation of epithelial-like cells from normal human tissues. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 87: 440-443, 1954. PubMed: 13237268 Murphy WH, Landau BJ. Clonal variation and interaction of cells with viruses. Natl. Cancer Inst. Monogr. 7: 249-271, 1962. PubMed: 14477443 Benn J, et al. Hepatitis B virus HBx protein induces transcription factor AP-1 by activation of extracellular signal-regulated and c-Jun N-terminal mitogen-activated protein kinases. J. Virol. 70: 4978-4985, 1996. PubMed: 8764004 NTCC CCL-13(Chang Liver)人子宫颈癌细胞特点和简介 HeLa是第一个来自人体组织经连续培养获得的非整倍体上皮样细胞系,它由Gey GO等在1951年从31岁女性黑人的宫颈癌组织建立。经原始组织切片重新观察,Jones等将其诊断为腺癌。已知该细胞系含有人乳头状瘤病毒HPV18序列,需在2级生物安全防护台操作。该细胞角蛋白阳性,p53表达量较低,但表达正常水平的pRB(视网膜母细胞瘤抑制因子)。 NTCC CCL-13(Chang Liver)人子宫颈癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CCL-13(Chang Liver)人子宫颈癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CCL-13(Chang Liver)人子宫颈癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CCL-13(Chang Liver)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2963(SU-DHL-10) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2963(SU-DHL-10),SU-DHL-10, 人大细胞淋巴瘤 存储人: A Epstein 种属来源: 人 组织来源: 淋巴 疾病特征: 大细胞淋巴瘤 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2963 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: D5S818: 11, 12 D13S317: 10, 11 D7S820: 8, 11 D16S539: 10, 11 vWA: 17 THO1: 8, 9.3 TPOX: 8 CSF1PO: 10, 13 Amelogenin: XY 同工酶: IgG lambda 参考文献: -- NTCC CRL-2963(SU-DHL-10)人大细胞淋巴瘤接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2963(SU-DHL-10)人大细胞淋巴瘤培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2963(SU-DHL-10)人大细胞淋巴瘤培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2963(SU-DHL-10)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-10302(SW756) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-10302(SW756), SW756, 人子宫鳞状癌细胞 存储人: Univ. Texas System, Board of Regents 种属来源: 人 组织来源: 子宫 疾病特征: 子宫鳞状癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-10302 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 11,12 D13S317: 11 D16S539: 12,13 D5S818: 11,12 D7S820: 10,12 THO1: 9.3 TPOX: 8 vWA: 17 同工酶: G6PD, B GLO-I, 1-2 参考文献: Freedman RS, et al. Monoclonal antibody to a human MDR1 multidrug resistance gene product, and uses. US Patent 5,434,076 dated Jul 18 1995 Freedman RS, et al. Characterization of a cell line (SW756) derived from a human squamous carcinoma of the uterine cervix. In Vitro 18: 719-726, 1982. PubMed: 7129487 PR8/A/34 The SW756 cell line was initiated by A. Leibovitz at the Scott and White Clinic, Temple, Texas in 1974 from biopsy material from a poorly differentiated invasive squamous carcinoma of the uterine cervix. The patient had not received chemotherapy or radiation prior to the biopsy. NTCC CRL-10302(SW756)人子宫鳞状癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-10302(SW756)人子宫鳞状癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-10302(SW756)人子宫鳞状癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-10302(SW756)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2350(alphaTC1 Clone 9) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2350(alphaTC1 Clone 9), alphaTC1 Clone 9, 小鼠胰腺癌细胞 存储人: EH Leiter 种属来源: 小鼠 组织来源: 胰腺 疾病特征: 胰腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2350 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 2 应用: 该细胞系是有用的研究胰高血糖素的生物合成和α-细胞对细胞因子的敏感性。 参考文献: Powers AC, et al. Proglucagon processing similar to normal islets in pancreatic alpha-like cell line derived from transgenic mouse tumor. Diabetes 39: 406-414, 1990. PubMed: 2156740 Hamaguchi K, Leiter EH. Comparison of cytokine effects on mouse pancreatic alpha-cell and beta-cell lines. Viability, secretory function, and MHC antigen expression. Diabetes 39: 415-425, 1990. PubMed: 2108069 transgenic for the SV40 T antigen transgenic for the SV40 T antigen NTCC CRL-2350(alphaTC1 Clone 9)小鼠胰腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2350(alphaTC1 Clone 9)小鼠胰腺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2350(alphaTC1 Clone 9)小鼠胰腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2350(alphaTC1 Clone 9)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-2119(HPAC) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-2119(HPAC),HPAC, 人胰腺癌细胞 存储人: WR Gower 种属来源: 人 组织来源: 胰腺 疾病特征: 胰腺癌 细胞形态: 上皮细胞样 生长特性: 贴壁生长 培养基: DMEM培养基,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-2119 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 STR: Amelogenin: X CSF1PO: 13 D13S317: 11 D16S539: 9,10 D5S818: 12 D7S820: 10,12 THO1: 9.3 TPOX: 10,11 vWA: 15,17 参考文献: Gower WR Jr., et al. HPAC, a new human glucocorticoid-sensitive pancreatic ductal adenocarcinoma cell line. In Vitro Cell. Dev. Biol. 30A: 151-161, 1994. NTCC CRL-2119(HPAC)人胰腺癌细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-2119(HPAC)人胰腺癌细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-2119(HPAC)人胰腺癌细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-2119(HPAC)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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ATCC CRL-1582(MOLT-4) cell line细胞株细胞系-BioVector NTCC质粒载体菌种细胞基因保藏中心

细胞名称: NTCC CRL-1582(MOLT-4), MOLT-4, 人急性淋巴母细胞白血病细胞 存储人: J Minowada 种属来源: 人 组织来源: 淋巴细胞 疾病特征: 急性淋巴母细胞白血病 细胞形态: 淋巴母细胞样 生长特性: 悬浮生长 培养基: RPMI-1640,90%;FBS,10%。 产品目录号: CRL-1582 生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, 传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 STR: Amelogenin: XY CSF1PO: 11, 12, 13 D13S317: 12, 13 D16S539: 11, 14 D5S818: 12 D7S820: 8, 10, 11 THO1: 6, 8 TPOX: 8 vWA: 17, 18 备注: Nucleotide (GenBank) : AF146433 Homo sapiens cell-line MOLT-4 sodium/hydrogen exchanger isoform 1 mRNA, complete cds. 参考文献: Minowada J, et al. Rosette-forming human lymphoid cell lines. I. Establishment and evidence for origin of thymus-derived lymphocytes. J. Natl. Cancer Inst. 49: 891-895, 1972. PubMed: 4567231 Ohsugi Y, et al. Tumorigenicity of human malignant lymphoblasts: comparative study with unmanipulated nude mice, antilymphocyte serum-treated nude mice, and X- irradiated nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 65: 715-718, 1980. PubMed: 6932523 Mertelsmann R, et al. T-cell growth factor (interleukin 2) and terminal transferase activity in human leukemias and lymphoblastic cell lines. Blut 43: 99-103, 1981. PubMed: 6942897 NTCC CRL-1582(MOLT-4)人急性淋巴母细胞白血病细胞特点和简介 MOLT-4与MOLT-3来源于一名19岁的男性急性淋巴细胞性白血病的复发患者,该患者前期接受过多种药物联合化疗。MOLT-4细胞系为T淋巴细胞起源,p53基因的第248位密码子有一个G→A突变,不表达p53,不表达免疫球蛋白或EB病毒;可产生高水平的末端脱氧核糖转移酶;表达CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%)。 NTCC CRL-1582(MOLT-4)人急性淋巴母细胞白血病细胞接受后处理 1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本保藏中心附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本保藏中心附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 NTCC CRL-1582(MOLT-4)人急性淋巴母细胞白血病细胞培养操作 1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 NTCC CRL-1582(MOLT-4)人急性淋巴母细胞白血病细胞培养注意事项 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 BioVector NTCC Inc. 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 NTCC CRL-1582(MOLT-4)标准细胞株说明书pdf版和相关资料下载

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